假基因PTENP1通過調(diào)控PTEN蛋白的表達(dá)影響胃癌進(jìn)展的研究.pdf

1、背景:
　　長鏈非編碼RNA(long non-coding RNAs，lncRNAs)是一類轉(zhuǎn)錄本長度超過200nt的RNA分子，它們?nèi)狈Φ鞍拙幋a的潛能。近年來，大量證據(jù)表明lncRNAs能以RNA的形式在多種層面上（表觀遺傳調(diào)控、轉(zhuǎn)錄調(diào)控以及轉(zhuǎn)錄后調(diào)控等）調(diào)控基因的表達(dá)，從而在細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、分化和凋亡等多種生物學(xué)進(jìn)程中發(fā)揮重要的作用。假基因轉(zhuǎn)錄得到的RNA也屬于lncRNA的一類，以前被認(rèn)為沒有生物學(xué)功能，然而最近一些假

2、基因被證實(shí)在腫瘤的發(fā)生中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用。PTENP1被發(fā)現(xiàn)在幾種腫瘤細(xì)胞中發(fā)揮著抑癌作用，然而它在胃癌中的表達(dá)和生物學(xué)功能仍不清楚。
　　目的:
　　研究胃癌組織和細(xì)胞系中PTENP1的表達(dá)水平及其與臨床病理資料的關(guān)系，并探索PTENP1在胃癌細(xì)胞中發(fā)揮的生物學(xué)功能及相關(guān)機(jī)制。
　　方法:
　　通過實(shí)時定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qRT-PCR)檢測68例胃癌組織及4個胃癌細(xì)胞系中PTENP1的表達(dá)水平;通過去甲

3、基化藥物處理，研究PTENP1啟動子異常甲基化與其表達(dá)的關(guān)系;分別轉(zhuǎn)染pLJM-3'UTR或pLJM空質(zhì)粒進(jìn)入胃癌細(xì)胞系MGC-803及SGC-7901，通過CCK-8及平板克隆實(shí)驗(yàn)研究PTENP1對胃癌細(xì)胞增殖能力的影響，通過流式細(xì)胞分析及Hoechst staining實(shí)驗(yàn)研究PTENP1對細(xì)胞凋亡的影響，通過細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和transwell研究PTENP1對細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響;通過qRT-PCR及Western blot分析

4、質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后PTEN的表達(dá)變化。
　　結(jié)果:
　　qRT-PCR檢測結(jié)果顯示PTENP1表達(dá)在胃癌組織和細(xì)胞系中顯著下調(diào)，其表達(dá)下調(diào)可能部分與DNA超甲基化有關(guān)。而且，PTENP1的低表達(dá)與腫瘤的大小、胃癌病人臨床分期、胃癌浸潤深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。另外，結(jié)果顯示PTENP1能夠調(diào)節(jié)胃癌細(xì)胞的增殖、凋亡、遷移和侵襲。并且，PTENP13'UTR的表達(dá)升高能夠提高PTEN蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)論:
　　PTENP1