TOLL樣受體4對(duì)缺氧誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)的調(diào)控作用.pdf

1、目的：
　　觀察體外培養(yǎng)的人RPE細(xì)胞在常氧及缺氧狀態(tài)下TLR4和VEGF的表達(dá)變化；觀察用TLR4的促進(jìn)劑LPS處理RPE細(xì)胞后再給與缺氧處理，TLR4和VEGF的表達(dá)及兩者的相關(guān)性。
　　方法：
　　1.1‰COCL2分別處理RPE細(xì)胞0h、2h、4h、8h、12h和24h建立化學(xué)缺氧模型，用免疫熒光的方法觀察RPE細(xì)胞中TLR4的表達(dá)，用RT-PCR和Westernblot方法檢測(cè)細(xì)胞中TLR4和VEGF的表達(dá)；

2、
　　2.LPS處理RPE細(xì)胞3h后再分別給與缺氧處理0h、2h、4h、8h、12h和24h，用RT-PCR和Westernblot檢測(cè)細(xì)胞中TLR4和VEGF的表達(dá)。結(jié)果：
　　1.激光共聚焦顯微鏡觀察，常氧狀態(tài)下RPE細(xì)胞有TLR4的微弱表達(dá)，隨缺氧時(shí)間延長(zhǎng)，TLR4表達(dá)增強(qiáng)，缺氧時(shí)間12h后達(dá)到峰值；TLR4和VEGFmRNA及蛋白表達(dá)均隨著缺氧時(shí)間延長(zhǎng)增強(qiáng)，缺氧12h后表達(dá)最強(qiáng)；
　　2.經(jīng)過(guò)LPS預(yù)處理后再進(jìn)