枸杞多糖對人視網(wǎng)膜色素上皮細胞的保護作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
　　研究枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides,LBP)對H2O2誘導的人視網(wǎng)膜色素上皮細胞株(ARPE-19細胞)損傷的保護作用,以及探討枸杞多糖對CoCl2誘導的ARPE-19細胞表達VEGF的影響。
　　方法:
　　采用CCk-8法檢測不同濃度H2O2誘導的ARPE-19細胞的存活率,構(gòu)建氧化損傷模型;采用CCk-8法檢測不同濃度LBP對ARPE-19細胞活力的影響;采用

2、CCk-8法和流式細胞儀雙染法檢測LBP對H2O2誘導的ARPE-19細胞的存活率和凋亡比例的影響;采用實時定量PCR法分別檢測LBP干預、H2O2損傷和正常情況下細胞Bax和Bcl-2表達水平的差異;采用ELISA法檢測不同濃度CoCl2的誘導對ARPE-19細胞分泌VEGF的影響;采用實時定量PCR法分別檢測LBP干預、CoCl2誘導和正常情況下細胞VEGF表達水平的差異。
　　結(jié)果:
　　CCk-8結(jié)果顯示,H2O2濃

3、度為500-900μmol/L時,細胞存活率與對照組有統(tǒng)計學差異,損傷作用呈濃度依賴性,其中當H2O2濃度為500μmol/L,細胞半數(shù)存活,為最佳氧化損傷模型;CCk-8結(jié)果顯示,LBP濃度為10μg/ml-5mg/ml時,細胞存活率與對照組無統(tǒng)計學差異,而當LBP濃度為10mg/ml時,細胞活性受抑制;CCk-8結(jié)果顯示,LBP濃度為100-1000μg/ml時,細胞存活率與對照組有統(tǒng)計學差異,其中 LBP濃度為500μg/ml時,

4、保護效果最明顯;流式細胞儀雙染法檢測結(jié)果顯示,LBP干預組細胞凋亡比例明顯低于H2O2損傷組;實時定量PCR結(jié)果顯示,LBP干預后細胞Bax表達降低,Bcl-2表達升高,與H2O2損傷組有統(tǒng)計學差異;ELISA結(jié)果顯示CoCl2濃度為150μmol/L和450μmol/L時,細胞VEGF分泌量與對照組有統(tǒng)計學差異,其中當CoCl2濃度為150μmol/L時,VEGF分泌量最高;實時定量PCR結(jié)果顯示,LBP濃度為10μg/ml、25μg

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