三陰性乳腺癌組織中PD-L1蛋白表達及腫瘤浸潤淋巴細胞數(shù)目與患者預后分析.pdf

1、背景：2015年ACS公布的癌癥統(tǒng)計顯示乳腺癌占美國女性腫瘤新發(fā)病的第一位（25％），有超過4萬名女性死于乳腺癌，占死亡總數(shù)的15%1。2012年全球癌癥統(tǒng)計顯示，與2008年相比，全球乳腺癌患者增長20%以上，死亡率增長14%，其中我國乳腺癌患病人數(shù)為69.7萬，死亡人數(shù)為4.8萬2，在2011年分型中，人表皮生長因子受體2(HER2)陽性的乳腺癌患者，在使用靶向藥物治療后生存明顯獲益，在一些發(fā)達國家中，五年生存率已到達90%3。然而

2、對于受體三陰性乳腺癌患者來說，因為缺少特異性的靶點，所以要面臨復發(fā)早、進展快，生存期短等問題。由于對內分泌治療及抗HER2的靶向藥物治療不敏感，三陰性乳腺癌患者的五年生存率僅有60%4，找出新的治療的策略迫在眉睫。
　　程序性死亡配體1(Programmed death ligand1,PD-L1)作為免疫球蛋白超家族負性共刺激分子的重要成員，參與機體免疫調節(jié)過程。PD-L1是程序性死亡受體-1（Programmed death1

3、，PD-1）的主要配體，PD-1是1992年由Ishida等在對T細胞雜交瘤的凋亡研究中發(fā)現(xiàn)的與細胞凋亡相關的蛋白5，1999年PD-1的配體被Dong等發(fā)現(xiàn)并且取名為PD-L1，隨后命名為CD2746；進一步研究發(fā)現(xiàn)PD-L2，命名為CD2737。PD-1：PD-L1信號通路可以通過對T細胞的抑制負調控免疫應答，進而在免疫耐受，微生物感染，腫瘤免疫逃逸，過敏中發(fā)揮重要作用。TIL與PD-1是T淋巴細胞活化過程中重要的負性共刺激分子，可

4、以抑制激活T淋巴細胞，避免腫瘤細胞受到T淋巴細胞的攻擊。部分早期研究顯示PD-1和TIL也與較差的預后相關8。同時也有學者發(fā)現(xiàn)PD-1的配體PD-L1在部分TIL表明也有所表達，通過聯(lián)合其他TIL表面上的PD-1發(fā)揮作用9,10。關于PD-L1在乳腺癌中表達的數(shù)據(jù)非常有限，近期一些研究指出，PD-L1在乳腺癌中的表達可作為不良預后10和保護性因素11的預測指標。同時一項大樣本的獨立隊列研究表明，三陰性乳腺癌中PD-L1的表達明顯高于非三

5、陰性乳腺癌患者，并且癌巢內CD8+T細胞的表達也與PD-L1的陽性表達有關，但預后的意義不明確，而三陰性乳腺癌中PD-L1與TILs之間的關系尚未見報道。
　　本研究對中山腫瘤醫(yī)院及我院共215例三陰性乳腺癌患者PD-L1與腫瘤浸潤淋巴細胞TIL進行評估，分析PD-L1與TIL之間的關系與對患者的臨床結局的影響。
　　目的：在乳腺癌中，三陰性乳腺癌（TNBC）的預后較差，所以有必要找出一個有效的治療策略。目前研究發(fā)現(xiàn)PD-L

6、1通路在腫瘤免疫逃逸中有著重要地位，所以推測阻斷PD-1：PD-L1通路可以增加T細胞的抗腫瘤免疫活性及提高宿主抗腫瘤免疫反應。抗PD-1及抗PD-L1抗體已經(jīng)在實驗中觀察到具有明顯抗腫瘤活性12，然而目前關于PD-L1在TNBC中的臨床研究及分析數(shù)據(jù)不足。
　　資料與方法：選取中山大學腫瘤醫(yī)院及中山大學第一附屬醫(yī)院組織標本庫中1999年7月至2012年10的三陰性乳腺癌患者215例，215例組織樣本被制成組織芯片，所有病例均為女

7、性，年齡在27-78歲，中位隨訪年齡為49歲。用免疫組化和蘇木素染色的方法檢測215例三陰性乳腺癌組織中PD-L1和TILs的表達，并分析其與患者各項臨床病例特征及預后的關系。
　　現(xiàn)今對PD-L1的判定標準尚未統(tǒng)一，推薦使用的方法是對組織細胞著色程度與被染色細胞數(shù)目進行評分，被染細胞數(shù)與著色程度得分的乘積：≤1記為陰性，＞1記為陽性。其中（-）記為PD-L1陰性患者，（+）記為PD-L1陽性的患者。
　　TIL是有兩位高年

8、資病理科醫(yī)生在雙盲條件下分別對腫瘤間質和腫瘤內的TIL進行觀察，其中陽性細胞數(shù)在0%-10%記為低表達；11%-40%記為中度表達；41%-100%記為高表達。除此還將TIL≥50%的患者記為淋巴細胞主導型乳腺癌患者（LPBC），TIL＜50%的患者為非淋巴細胞主導型乳腺癌患者。
　　統(tǒng)計學方法：應用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件對結果進行統(tǒng)計，卡方檢驗對計數(shù)資料進行分析，使用Kaplan-Meier對總生存率和無病生存率進行分析，對

9、于單因素分析后有有統(tǒng)計學意義的因素用非條件Logistic回歸進行統(tǒng)計學分析。
　　結果：中位隨訪時間為67.7個月（7個月-159個月）。PD-L1陽性的患者中位總生存時間為89個月，PD-L1陰性的患者中位總生存時間為72個月,P=0.019,P<0.05，有統(tǒng)計學意義。PD-L1陽性的患者中位無病生存時間為137個月，PD-L1陰性的患者中位無病生存時間為116個月,P=0.046,P<0.05，有統(tǒng)計學意義。在TNBC患者

10、中PD-L1陽性的患者中位總生存時間及中位無病生存時間比PD-L1陰性的患者明顯延長。
　　STILs高表達患者的中位總生存時間為107個月，STILs中度表達患者的中位總生存時間為82個月，STILs低表達的患者中位總生存時間為64個月，P=0.026,P<0.05，有統(tǒng)計學意義。STILs高表達的患者中位無病生存時間為126個月，STILs中度表達的患者中位無病生存時間為135個月，STILs低表達的患者中位無病生存時間為11

11、9個月，P=0.325,P≥0.05，無統(tǒng)計學意義。在TNBC患者中STILs高表達的患者具有更長的中位總生存時間。(P=0.026)。
　　多因素COX回歸分析結果顯示PD-L1、STILs是三陰性乳腺癌患者生存的獨立因素。在STILs≥50%（LPBC）的患者中PD-L1蛋白表達率高于STILs<50%的患者，（P=0.004）。
　　結論：在TNBC患者中PD-L1、STILs與患者生存及預后密切相關。PD-L1陽性表