腫瘤生物標(biāo)志—Glypican-3臨床應(yīng)用價(jià)值的基礎(chǔ)研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文腫瘤生物標(biāo)志—Glypican3臨床應(yīng)用價(jià)值的基礎(chǔ)研究姓名：王媛媛申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（消化系病學(xué)）指導(dǎo)教師：肖冰李明松20080514中文摘要織和lO鍘肝硬化組織標(biāo)本中GPC3蛋自的表達(dá)情況。剩用商品化的ELISA檢測試劑盒，對HCC、肝硬化、慢性肝炎等多種肝臟疾病及胃腸腫瘤患者和健康供者血清中的GPC3蛋自進(jìn)行了較大范圈的診斷性檢測。對45例HCC患者血清中GPC3蛋白及AFP進(jìn)行聯(lián)合檢測，同時(shí)比較

2、分析了經(jīng)過TAE、RF和／或光子刀治療前后的患者盤清中GPC3蛋自與AFP的動態(tài)變化。此外，本文在證實(shí)GPC3在HCC組織中特異表達(dá)的基礎(chǔ)上，還對6PC3是否可以作為腫瘤免疫治療的新靶點(diǎn)進(jìn)行了初步探討。用體外表達(dá)的兩段GPC3全長蛋自中CTL表位肽，分別為A肽GPC3瓣掰(EYILSLEEL)及B肽GPC3腫愀(FvGEFFTDV)，作為免疫原誘導(dǎo)BALB／c小鼠體內(nèi)免疫，同時(shí)將兩種表位肽部分偶聯(lián)血藍(lán)蛋白(KLH)后分別免疫BALB／c

3、小鼠。將36只雌性BALB／c小鼠隨機(jī)分為6組，4個(gè)實(shí)驗(yàn)組及2個(gè)對照組，6只／組。第l、2實(shí)驗(yàn)組小鼠分別免疫單獨(dú)的A肽及B肽；第3、4實(shí)驗(yàn)組分別免疫偶聯(lián)KLH的A肽及B肽；第5、6組分別為單獨(dú)免疫KLH的對照組和生理鹽水空白對照組。最后一次免疫結(jié)束7天后取小鼠脾臟并分離淋巴細(xì)胞，以ELISPOT方法檢測特異性斑點(diǎn)，計(jì)數(shù)活化的T細(xì)胞以判斷兩種肽是否可以誘導(dǎo)特異性免疫應(yīng)答。同時(shí)采用流式細(xì)胞技術(shù)分析CD4T和CD8T細(xì)胞亞群的比鍘變化，以判斷

4、小鼠體內(nèi)的免疫反應(yīng)，尤其是細(xì)胞免疫。結(jié)果：免疫組織化學(xué)方法檢測結(jié)果：陽性表現(xiàn)為棕色顆粒均勻地分布在肝癌細(xì)胞的胞漿區(qū)和胞膜上。lO例肝細(xì)胞癌中有7例表達(dá)GPC3(70％)，其中2例低表達(dá)；在iO例癌旁組織及10側(cè)肝硬化組織中均未發(fā)現(xiàn)6PC3的表達(dá)。同時(shí)6PC3的表達(dá)又具有細(xì)胞特異性，其在肝癌組縱中的膽管上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞及浸潤的淋巴細(xì)胞上的表達(dá)均呈陰性。ELISA檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)：HCC患者血清中GPC3濃度顯著高于其他肝臟疾