HDACi對苯吸入模型小鼠TOPⅡα水平改變的影響.pdf

1、目的:
　　苯作為一種重要的工業(yè)化學物質(zhì)，被廣泛應用于工業(yè)生產(chǎn)和生活。過度暴露于苯所帶來的危害也日漸為人們所重視。苯對骨髓的造血系統(tǒng)的抑制可導致血三系的下降，甚至造成再生障礙性貧血、白血病等嚴重血液疾病。故而對其進行進一步深入的研究具有重要意義。本課題組前期體外研究證實苯及其代謝物處理后骨髓單個核細胞TOPOⅡα的水平發(fā)生改變。本研究旨在建立苯吸入小鼠模型，驗證模型小鼠骨髓單個核細胞TOPOⅡα基因表達(mRNA水平、蛋白表達量)

2、及酶活性的變化。探索應用HDACi(TSA、MCP30)后對模型小鼠骨髓單個核細胞TOPOⅡα水平改變的影響。
　　方法:
　　1.建立苯吸入小鼠模型:6-7周齡的CD1雄性小鼠隨機分為6組，分別為對照組、苯組、TSA組、苯+TSA組、MCP30組、苯+MCP30組。其中苯組、苯+TSA組、苯+MCP30組進行為期2月的動式苯吸入染毒，苯+TSA組、MCP30組、苯+MCP30組按時按規(guī)定給藥。
　　2.運用Weste

3、rn Blot法檢測苯模型小鼠骨髓單個核細胞TOPOⅡα蛋白表達的改變。
　　3.應用TOPOⅡ檢測試劑盒，根據(jù)DNA超螺旋解旋法檢測各組小鼠骨髓單個核TOPOⅡ酶活性的變化。
　　4.運用Real time PCR測定各組模型小鼠骨髓單個核細胞TOPOⅡα mRNA水平的改變。
　　結(jié)果:
　　1.苯吸入小鼠模型建立， Western blot法檢測TOPOⅡα蛋白表達量
　　1)苯組較對照組明顯降低，差

4、異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);苯+TSA組、苯+MCP30組較對照組降低，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　2)苯+TSA組、苯+MCP30組較苯組蛋白表達量升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。苯+TSA組與苯+MCP30組無明顯統(tǒng)計學差異。苯+TSA組較TSA組降低，苯+MCP30組較MCP組降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　3) TSA組與MCP30組較對照組，無明顯統(tǒng)計學差異。
　　2.DNA

5、超螺旋解旋法檢測苯吸入小鼠模型TOPOⅡ酶活性結(jié)果
　　1)苯組較對照組降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);苯+TSA組、苯+MCP30組較對照組降低，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　2)苯+TSA組、苯+MCP30組較苯組蛋白表達量升高，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。苯+TSA組與苯+MCP30組無明顯統(tǒng)計學差異。苯+TSA組較TSA組降低，苯+MCP30組較MCP組降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。<

6、br>　　3) TSA組與MCP30組較對照組，無明顯統(tǒng)計學差異。
　　3.RT-PCR法檢測TOPOⅡα mRNA水平的結(jié)果
　　1)苯組較對照組明顯降低，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05);苯+TSA組、苯+MCP30組較對照組降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　2)苯+TSA組、苯+MCP30組較苯組mRNA水平升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。苯+TSA組與苯+MCP30組無統(tǒng)計學差異。苯+TSA組較

7、TSA組降低，苯+MCP30組較MCP組降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　3) TSA組與MCP30組較對照組，無明顯統(tǒng)計學差異。
　　結(jié)論:
　　1.建立苯吸入小鼠模型，300ppm苯濃度吸入后，苯組模型小鼠骨髓單個核細胞TOPOⅡα的mRNA水平和蛋白表達均下降，組蛋白TOPOⅡα酶活性受到抑制。
　　2.TSA、MCP30應用于苯吸入模型小鼠中，能提高苯吸入后小鼠骨髓單個核細胞組蛋白的低乙?；?/p>