Chemerin及其受體ChemR23在肺癌中的表達(dá)和功能的研究.pdf

1、目的：前期研究通過消減雜交技術(shù)已經(jīng)初步發(fā)現(xiàn)TIG2基因是肺癌差異表達(dá)基因。預(yù)測(cè)TIG2基因可能與肺癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。Chemerin是TIG2基因編碼的蛋白。它是一種類似于趨化因子的趨化蛋白。ChemR23是Chemerin目前已知的唯一受體。我們將研究Chemerin及其受體ChemR23在肺癌中的表達(dá)情況，并探討兩者對(duì)肺癌發(fā)生、發(fā)展的影響。 方法： 用免疫印跡的方法檢測(cè)肺癌組織與正常肺組織Chemerin及Chem

2、R23的表達(dá)，用免疫組化的方法檢測(cè)肺癌組織切片中Chemerin和ChemR23的表達(dá)部位。用RT-PCR的方法檢測(cè)人正常胚胎肺細(xì)胞WI-38和肺癌細(xì)胞A549中Chemerin和ChemR23的表達(dá)情況，應(yīng)用Chemerin和ChemR23特異性擴(kuò)增引物，借助RT-PCR獲得Chemerin和ChemR23全長(zhǎng)cDNA片段，分別插入pCDNA3.1表達(dá)載體中，并將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至肺癌細(xì)胞A549細(xì)胞系中，G418穩(wěn)定篩選，應(yīng)用體外增殖、

3、運(yùn)動(dòng)、侵襲試驗(yàn)比較細(xì)胞增殖、運(yùn)動(dòng)、侵襲能力的改變，用免疫印跡方法檢測(cè)pCDNA3.1-ChemR23轉(zhuǎn)染的A549細(xì)胞內(nèi)腫瘤相關(guān)信號(hào)通路蛋白NF-kB、JNK和P38的表達(dá)情況。 結(jié)果： 肺癌組織中Chemerin的表達(dá)較正常肺組織低，ChemR23在肺癌組織和正常肺組織中表達(dá)沒有明顯差別，兩者在肺癌組織中均主要在肺癌細(xì)胞中表達(dá)。肺癌細(xì)胞A549中Chemerin不表達(dá)，ChemR23表達(dá)。正常肺細(xì)胞WI-38中Chem