赫賽汀對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB453化療增敏作用的研究.pdf

1、[目的]探討赫賽汀(HER)對(duì)化療藥泰索帝(TXT)、蓋諾(NVB)、順鉑(DDP)、阿霉素(ADM)、健擇(GEM)、依托泊甙(VP-16)增敏的規(guī)律及其機(jī)制，為臨床赫賽汀聯(lián)合化療藥物聯(lián)合使用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 [方法]應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)方法選擇HER-2高表達(dá)的細(xì)胞系進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究；應(yīng)用四氮唑藍(lán)(MTT)快速比色法測(cè)定赫賽汀組、單藥化療組以及以不同序貫方式結(jié)合的赫賽汀聯(lián)合化療組對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株(MDA-MB453)的生長(zhǎng)抑制率：流式

2、細(xì)胞儀各組細(xì)胞周期的變化。 [結(jié)果] 1、免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)MDA-MB453 HER-2蛋白表達(dá)為(3+)。 2、化療藥物HER、TXT、NVB、DDP、ADM、GEM、VP-16均對(duì)體外MDA-MB453細(xì)胞有直接的抑制和殺傷作用(P<0.001)； 3、MTT檢查發(fā)現(xiàn)：(1)使用HER18h后應(yīng)用TXT組取得最高的抑制率，明顯高于其他序貫組及單藥TXT組(P<0.05)，發(fā)揮協(xié)同作用；(2)使用N

3、VB后40h應(yīng)用HER組的抑制率高于單藥NVB組(P<0.01)，此時(shí)抑制率最高，發(fā)揮協(xié)同作用；使用NVB組10h后應(yīng)用HER組抑制率低于單藥NVB組(P<0.05)，此時(shí)拮抗作用最強(qiáng)；(3)HER與DDP聯(lián)用時(shí)抑制率均好于單藥DDP(P<0.01)，各組均為相加作用，其中以同時(shí)作用時(shí)效果最好；(4)各序貫ADM+HER聯(lián)合作用組抑制率好于單藥ADM組，表現(xiàn)為相加或協(xié)同作用；其中使用ADM后12～24h組協(xié)同作用較強(qiáng)；(5)使用HER后

4、應(yīng)用GEM組及HER+GEM同時(shí)應(yīng)用組抑制率高于單藥(P<0.01)：使用GEM后應(yīng)用HER組抑制率明顯低于單藥GEM組；同時(shí)使用時(shí)表現(xiàn)為相加作用，其他組則為拮抗作用；(6)使用HER后應(yīng)用VP16組、HER+VP16同時(shí)應(yīng)用組及使用VP16 24h后應(yīng)用HER組抑制率高于單藥(P<0.01)，同時(shí)應(yīng)用組及化療前應(yīng)用HER組表現(xiàn)為相加作用，以化療前6h應(yīng)用最好。 4、細(xì)胞周期分析發(fā)現(xiàn)：(1)單藥HER引起細(xì)胞周期G1期阻滯，S期

5、減少；(2)單獨(dú)TXT使細(xì)胞周期阻滯于G<,2>/M期；與單藥TXT化療組相比，使用HER18h后應(yīng)用TXT組G<,0>/G<,1>期細(xì)胞所占比例增加，G<,2>/M期細(xì)胞減少，而使用TXT6h后應(yīng)用HER組則S期細(xì)胞所占比例明顯增加，G<,2>/M期細(xì)胞明顯減少；(3)單獨(dú)NVB將細(xì)胞周期阻滯于G<,2>/M期；與單藥化療組相比，使用NVB 10h后應(yīng)用HER組G<,0>/G<,1>期細(xì)胞所占比例減少，S、G<,2>/M期細(xì)胞增多；而

6、其他序貫組則相反；(4)單獨(dú)DDP使細(xì)胞周期阻滯于G<,2>/M期；與單藥DDP組相比，先使用HER后應(yīng)用DDP組G<,0>/G<,1>、S期期細(xì)胞所占比例減少，G<,2>/M期細(xì)胞增多，而其他組則未見(jiàn)明顯變化；(5)單藥ADM使腫瘤細(xì)胞阻滯在G<,2>/M期；使用ADM 24h后應(yīng)用HER組較其他序貫方式組及單藥ADM組，G<,0>/G<,1>、S期比例下降，G<,2>/M期比例升高；隨著赫賽汀與ADM序貫方式的改變，G<,2>/G<

7、,1>、S期比例逐漸下降，G<,2>/M期比例升逐漸升高；(6)單藥GEM使腫瘤細(xì)胞阻滯在S、G<,2>/M期；GEM+HER同時(shí)應(yīng)用組S期阻滯增強(qiáng)；隨著序貫方式的改變，G<,2>/M期所占比例逐漸降低；(7)單藥VP-16使細(xì)胞周期阻滯在S、G<,2>/M期：先HER后VP-16組及VP-16+HER同時(shí)應(yīng)用組S期比例增高，G<,2>/M期比例下降；而使用VP-16 6h后應(yīng)用HER組引起明顯的G<,1>期阻滯，S、G<,2>/M期比

8、例減少。 [結(jié)論]赫賽汀同與不同化療藥物，以不同序貫方式使用可取得不同的生長(zhǎng)抑制作用：與泰索帝聯(lián)合時(shí)，提前18h應(yīng)用HER可取得最佳抑制作用；與蓋諾聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，化療后40h應(yīng)用HER為最佳序貫方式；與順鉑聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，先化療后使用HER可取得最佳效果；與阿霉素聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，化療至少12h后應(yīng)用HER時(shí)可取得最佳抑制作用；與健擇聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，同時(shí)應(yīng)用HER為最佳序貫方式；與VP16聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，提前6h應(yīng)用HER為最佳序貫方式。其發(fā)生機(jī)制