桑葚花色苷的提取及對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株mda-mb-453生長(zhǎng)的抑制

1、桑葚花色苷的提取及對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MDAMB453生長(zhǎng)的抑制王湛1，付鈺潔12，?；?，趙長(zhǎng)君1，糜漫天1（400038重慶，重慶第三軍醫(yī)大學(xué)：營(yíng)養(yǎng)與食品安全研究中心，重慶市營(yíng)養(yǎng)與食品安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室1；400050重慶，重慶理工大學(xué)：藥學(xué)與生物工程學(xué)院2）摘要：目的目的以超聲輔助乙醇浸提法提取桑葚花色苷，并觀察其對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MDAMB453體內(nèi)外生長(zhǎng)的抑制作用。方法方法將桑葚冷凍干燥，冷凍干粉于常溫下用70%濃度的乙醇以1﹕15的料

2、液比超聲提取1h，提取液采用Amberlite?XAD7HP型大孔吸附樹(shù)脂以1mlmin的吸附流速和1mlmin的洗脫流速在pH3.0酸性環(huán)境下純化，得到桑葚花色苷提取物。利用CCK8法檢測(cè)桑葚花色苷提取物對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MDAMB453增殖活力的影響；以24只雌性BALBc裸鼠建立MDAMB453細(xì)胞移植瘤模型，隨機(jī)分為對(duì)照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組4組，分別以0、50、100、200mgkgd的桑葚花色苷提取物膳食干預(yù)，檢測(cè)其對(duì)

3、腫瘤生長(zhǎng)的影響。結(jié)果結(jié)果獲得花色苷平均含量為41.8%的桑葚花色苷提取物；CCK8法檢測(cè)結(jié)果表明，桑葚花色苷提取物可顯著降低乳腺癌細(xì)胞活力，并顯示劑量效應(yīng)關(guān)系；體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果表明，高劑量組和中劑量組移植瘤體積和質(zhì)量均顯著低于對(duì)照組，表明桑葚花色苷提取物膳食干預(yù)可有效抑制移植瘤的生長(zhǎng)。結(jié)論結(jié)論桑葚花色苷提取物能夠顯著抑制人乳腺癌細(xì)胞株MDAMB453的生長(zhǎng)。關(guān)鍵詞：桑葚花色苷；乳腺癌；移植瘤；MDAMB453Effectsofanthocy

4、aninextractofmulberryfruitonthegrowthoftransplantedtumofbreastcancerMDAMB453cellsWangZhan1，F(xiàn)uyujie12，ChangHui1ZhaoChangjun1MiMantian1(DepartmentofNutritionFoodHygieneCollegeofPreventiveMedicineThirdMilitaryUniversityChon

5、gqingKeyLabatyofNutritionFoodSafetyChongqing400038China1；SchoolofPharmacyBioengineeringChongqingUniversityofTechnologyChongqing400050China2)Abstract:ObjectiveStudyontheextractionofanthocyanincompoundsinmulberryfruitobser

6、veitseffectsonthegrowthofbreastcancerMDAMB453cellsinvitroinvivo.MethodsDrypowderofmulberryfruitafterfreezedehydrationwasdiffusedby70%ethanolwithsonicationthematerialliquidratiowas1﹕15.TheextractingsolutionwaspurifiedbyAm

7、berlite?XAD7HPresininpH3.0acidenvironmenttheabsptionflowratewas1mlmintheelutionflowratewas1mlmin.CellsviabilitywasdetectedbyCCK8assay.24femaleBALBcnudemicewereinjectedwithMDAMB453cellstoestablishtransplantedtummodels.The

8、micewereequallyromizedinto4groupsincludingcontrolgrouplowdosedledosehighdosetreatmentgroups.aladministrationofmulberryfruitanthocyaninextract(050100200mgkgdayrespectively)wasgiventothemicebearingcancercellxenografts.Tumv

9、olumesweremeasuredeveryfourdays.ResultsTheaveragecontentofanthocyanincompoundsofmulberryfruitanthocyaninextractwas41.8%.CCK8assayindicatedmulberryfruitanthocyaninextractreducedbreastcellsviabilitymarkedly.Tumsinhighdoseg

10、roupdledosegroupweresignificantlysmallerslighterthanthecontrol.Thegrowthoftransplantedtumsintreatmentgroupsweresuppressed.ConclusionThemulberryfruitanthocyaninextractcouldsignificantlysuppressthegrowthofhuman基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基

11、金資助項(xiàng)目（No.30901194）SupptedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(30901194）作者簡(jiǎn)介：王湛（1986），女，重慶市人，漢族，在讀碩士，助教，主要從事天然植物化合物的生物活性研究。電話（023）68752291，Email：cindy_12345@通訊作者：糜漫天，電話（023）68752292；Email:mimt2007@共處理28天取材。1.2.4腫瘤

12、體積檢測(cè)：使用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤的最長(zhǎng)徑(a)和最短徑(b)，按公式求出腫瘤體積V＝ab2。1.3統(tǒng)計(jì)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)均以平均值標(biāo)準(zhǔn)方差（s）表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，x兩組間差異比較采用t檢驗(yàn)，P值0.05認(rèn)為具有顯著性差異。2結(jié)果2.1獲得花色苷平均含量得花色苷平均含量為41.8%的桑葚花色苷提取物的桑葚花色苷提取物經(jīng)過(guò)超聲波輔助乙醇浸提法得到桑葚花色苷粗提物，再經(jīng)過(guò)樹(shù)脂吸附、洗脫，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)和冷凍干燥，得

13、到純化的桑葚花色苷提取物。利用pH示差法測(cè)定桑葚花色苷提取物中花色苷的總含量為41.84.8%。2.2桑葚花色苷提取物桑葚花色苷提取物對(duì)乳腺癌乳腺癌細(xì)胞活力的影響胞活力的影響CCK8法細(xì)胞活力檢測(cè)結(jié)果表明，相對(duì)于對(duì)照組，桑葚花色苷提取物作用各組吸光值下降，且隨作用劑量增加下降程度增加，100mgml以上劑量作用組與對(duì)照組相比出現(xiàn)顯著性差異（見(jiàn)表1），這表明，桑葚花色苷提取物可顯著降低乳腺癌MDAMB453細(xì)胞增殖活力，并呈現(xiàn)劑量效應(yīng)關(guān)系

14、，見(jiàn)圖1。表1.CCK8法細(xì)胞活力檢測(cè)結(jié)果桑葚花色苷提取物處理組（mgml）空白對(duì)照組50100150200吸光值0.0050.0030.5840.1210.4970.0440.4100.034a0.3910.034a0.3250.037baP0.05bP0.01與對(duì)照組比較抑制率(%)baa010203040506050mgml100mgml150mgml200mgml增殖抑制率（%）aP0.05bP0.01與對(duì)照組比較圖1.桑葚花色