非霍奇金淋巴瘤血清蛋白質(zhì)譜差異性研究.pdf

1、目的：①建立非霍奇金淋巴瘤血清差異蛋白診斷模型，探討其在非霍奇金淋巴瘤診斷中的意義。②探討不同病理類型非霍奇金淋巴瘤的血清蛋白質(zhì)譜差異；③探討彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤不同臨床特征的血清蛋白質(zhì)譜差異。④探討化療前后血清蛋白圖譜改變。
　　 方法：①應(yīng)用SELDI技術(shù)，以弱陽(yáng)離子芯片(CM10)結(jié)合血清蛋白質(zhì)，分析109例非霍奇金淋巴瘤病人及116例健康對(duì)照人群的血清樣本，得到其蛋白質(zhì)譜，用Biomarker Wizard和Biomark

2、er Pattern軟件分析二者之間的差異并建立分類樹(shù)診斷模型，隨機(jī)選取21例淋巴瘤和25例健康對(duì)照進(jìn)行盲篩；②按病理組織學(xué)分類，T細(xì)胞31例，B細(xì)胞78例；惰性B細(xì)胞14例，彌漫大B細(xì)胞52例(其中來(lái)自生發(fā)中心外活化B細(xì)胞17例)；套細(xì)胞10例；NK-T細(xì)胞12例，非NK-T細(xì)胞19例；比較不同病理類型間血清蛋白質(zhì)譜差異；③選取常見(jiàn)類型彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤，Ⅰ-Ⅱ期占31例，Ⅲ-Ⅳ期占21例；IPI評(píng)分≥2分16例，0-1分36例；β2

3、微球蛋白升高者40例，正常者12例；LDH升高者13例，正常者39例。比較不同分期、IPI、β2微球蛋白、LDH狀況下的血清蛋白質(zhì)譜差異；④采用篩選出的淋巴瘤和對(duì)照組間有差異的蛋白峰，通過(guò)自身配對(duì)T檢驗(yàn)，分析21例非霍奇金淋巴瘤化療前后的變化。
　　 結(jié)果：①41個(gè)血清蛋白質(zhì)峰在非霍奇金淋巴瘤和健康對(duì)照人群中表達(dá)具有顯著差異(P＜0.05)，主要包括質(zhì)荷比分別為2728、2754、3413、4099、4194、4367、5642

4、、5924、6451、8726、8793、6645Da的蛋白峰，經(jīng)Biomarker Pattern(BPS)軟件和分類回歸樹(shù)的統(tǒng)計(jì)原理篩選出最佳的組合模型，應(yīng)用其中M/Z為4367Da、27428Da差異蛋白峰建立淋巴瘤診斷模型，此分類樹(shù)模型可正確劃分98.89％(89/90)的淋巴瘤病人和100％(91/91)的健康對(duì)照人群。其盲法驗(yàn)證的靈敏度為95.24％(20/21)，特異度為100％(25/25)。②M/Z為8575Da、64

5、38Da、2728Da蛋白峰在B細(xì)胞淋巴瘤中高表達(dá)，在T細(xì)胞淋巴瘤中低表達(dá)；M/Z為8575Da、8703Da、6633Da的峰在惰性B細(xì)胞淋巴瘤中高表達(dá)，在彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤中低表達(dá)；M/Z為2728Da、3812Da蛋白峰在套細(xì)胞淋巴瘤中高表達(dá)，在彌漫大B細(xì)胞中低表達(dá)；惰性B細(xì)胞淋巴瘤與活化B細(xì)胞淋巴瘤及NK-T細(xì)胞淋巴瘤與非NK-T細(xì)胞淋巴瘤之間均未發(fā)現(xiàn)有差異的蛋白峰。③彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤，M/Z為2728Da蛋白峰在Ⅰ-Ⅱ期中高

6、表達(dá)，在Ⅲ-Ⅳ期中低表達(dá)；M/Z為2728Da、4085Da蛋白峰在IPI評(píng)分0-1分組中高表達(dá)，在IPI評(píng)分≥2分組中低表達(dá)；M/Z為3261Da、4085Da、5636Da蛋白峰在β2微球蛋白正常組中高表達(dá)，在β2微球蛋白升高組中低表達(dá)。LDH正常組與異常升高組之間沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的蛋白峰。④21例化療2周期以上的患者，質(zhì)荷比分別為2728、2754、3413、4099、4194、5642、5924、6451、8726、8793

7、、6645Da的淋巴瘤與對(duì)照組差異峰在化療前后無(wú)明顯改變。
　　 結(jié)論：①SELDI-TOF-MS技術(shù)發(fā)現(xiàn)了一系列的非霍奇金淋巴瘤與健康對(duì)照的血清蛋白差異峰，建立的血清蛋白質(zhì)譜診斷模型敏感性、特異性高；②B細(xì)胞淋巴瘤與T細(xì)胞淋巴瘤、彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤與惰性B細(xì)胞淋巴瘤、彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤與套細(xì)胞淋巴瘤之間的血清蛋白質(zhì)譜存在差異；③彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤分期不同、IPI評(píng)分高低、β2微球蛋白升高與否均存在不同的差異蛋白峰；④本研究中非