降解黃曲霉毒素B1益生菌的篩選、降解特性及其在蛋雞飼料中的應(yīng)用研究.pdf

1、本研究通過(guò)篩選得到一株具有降解黃曲霉毒素B1(AFB1)功能的菌株B26，經(jīng)過(guò)本實(shí)驗(yàn)室前期16S rDNA鑒定為枯草芽孢桿菌。通過(guò)固態(tài)發(fā)酵法測(cè)定菌株B26在不同濃度、溫度、時(shí)間、料水比條件下對(duì)AFB1的降解效果，獲得該菌株的最佳降解條件。同時(shí)將菌株B26制成菌粉添加到含發(fā)霉花生粕的蛋雞飼料中，從產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)、激素分泌、生化指標(biāo)、抗氧化性能、肝臟組織切片、DNA氧化損傷方面評(píng)價(jià)該菌對(duì)AFB1解毒效果及蛋雞機(jī)體損傷的保護(hù)作用。主要研究?jī)?nèi)

2、容和結(jié)果如下:
　　1.AFB1降解菌的篩選
　　通過(guò)對(duì)熱帶假絲酵母、安琪酵母、啤酒酵母、乳桿菌(LAc)、屎腸球菌、B06、B07、B14、B26菌體細(xì)胞降解AFB1的能力進(jìn)行篩選。在1×108cfu/mL菌液濃度，發(fā)霉花生粕中AFB1濃度為66.2μg/kg濃度下，枯草芽孢桿菌B26的降解效果最佳，降解率達(dá)到65.70％，熱處理B7、B26細(xì)胞后，無(wú)降解AFB1能力。
　　2.枯草芽孢桿菌B26對(duì)AFB1降解特性研

3、究
　　利用固態(tài)發(fā)酵法，研究其體外降解最佳濃度、溫度、時(shí)間、料水比。結(jié)果表明:在本試驗(yàn)條件下，B26降解最適條件為:菌體最佳濃度為1×109cfu/mL、溫度為37℃、降解時(shí)間為48 h、料水比為1∶0.4。
　　3.枯草芽孢桿菌B26緩解飼料中AFB1對(duì)蛋雞危害作用的研究
　　試驗(yàn)選擇52周齡健康海蘭褐蛋雞240只，隨機(jī)分為5個(gè)組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12只雞，分別為飼喂基礎(chǔ)日糧A組和添加9％、18％霉變花生粕B、

4、C組（AFB1含量分別為35.83μg/kg、72.65μg/kg），及在含霉變花生粕日糧中添加0.5％枯草芽孢桿菌B26的D、E組。試驗(yàn)周期為50d，主要結(jié)果如下:
　　與對(duì)照組A相比，C組蛋雞的產(chǎn)蛋率顯著下降(P＜0.05);B組蛋雞平均日采食量和料蛋比顯著提高（P＜0.05）;C組料蛋比顯著升高了16.26％，日均采食量有下降趨勢(shì)。與C組相比，添加枯草芽孢桿菌B26的E組產(chǎn)蛋率顯著提高(P＜0.05)，但未達(dá)到對(duì)照組水平，各

5、組未檢測(cè)到雞蛋中AFB1的殘留。
　　蛋品質(zhì)與血清生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果表明:日糧中偏高的AFB1會(huì)導(dǎo)致蛋黃色澤變差、蛋殼強(qiáng)度降低(P＜0.05);升高血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、堿性磷酸酶(AKP)、血清和肝臟中8-羥基烏苷含量(P＜0.05)，顯著降低血清白蛋白(albumin)、雌二醇(E2)水平(P＜0.05);添加枯草芽孢桿菌兩組，蛋殼強(qiáng)度和蛋黃色澤值增加，與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)，生化指標(biāo)也基本恢復(fù)正常，肝臟中8-羥

6、基鳥(niǎo)苷含量顯著降低(P＜0.05)，但未達(dá)到對(duì)照組A水平。
　　抗氧化相關(guān)酶測(cè)定結(jié)果發(fā)現(xiàn):C組血清和肝臟中超氧化物歧化酶(SOD)的含量與對(duì)照組A相比，顯著下降(P＜0.05);除對(duì)照A組外，其它處理組谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)皆有不同程度的下降(P＜0.05);添加枯草芽孢桿菌的D組肝臟中GSH-Px水平顯著高于其它組;與對(duì)照組A相比，添加不同量發(fā)霉花生粕的兩組，血清中丙二醛(MDA)含量都顯著升高（P＜0.05）;添加

7、枯草芽孢桿菌的兩組與未添加的B、C組相比，MDA含量顯著下降，達(dá)到A組水平。
　　肝臟病理切片觀察發(fā)現(xiàn):添加發(fā)霉花生粕B、C組都有不同程度的肝臟損傷，C組肝組織甚至出現(xiàn)炎性浸潤(rùn)、細(xì)胞結(jié)構(gòu)崩解和有局灶性壞死;添加枯草芽孢桿菌D、E組大部分蛋雞肝臟脂肪變性和空泡變性減少，未發(fā)現(xiàn)有炎性浸潤(rùn)和壞死現(xiàn)象。
　　本研究表明:在本試驗(yàn)條件下，飼料中添加0.5％的枯草芽孢桿菌B26在一定程度上緩解了AFB1對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)、抗氧化功能