2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:(1)探討堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子單克隆抗體(bFGF單抗)聯(lián)合Lobaplatin(LBP)對(duì)肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞增殖、凋亡和轉(zhuǎn)移的影響及其可能的作用機(jī)制。
  (2)系統(tǒng)評(píng)價(jià)Lobaplatin聯(lián)合化療治療晚期非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)的療效和安全性。
  方法:制備腹水型bFGF單抗,體外培養(yǎng)肺腺癌A549細(xì)胞,將細(xì)胞分為四組(control組、bFGF單抗組、LBP組及bFGF單抗+LBP組)處理48h。

2、> ?。?)CCK-8法測(cè)定其對(duì)A549細(xì)胞增殖的影響;流式細(xì)胞儀檢測(cè)藥物作用后細(xì)胞周期分布的變化,Western blot法檢測(cè)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白CDK4和cyclin D的表達(dá)水平。
  (2)流式細(xì)胞儀檢測(cè)藥物作用A549細(xì)胞凋亡,DAPI染色激光共聚焦顯微鏡下觀察細(xì)胞凋亡過(guò)程中細(xì)胞核的變化,western blot法檢測(cè)細(xì)胞凋亡PI3K/Akt信號(hào)通路有關(guān)蛋白bcl-2、caspase-3、caspase-9、PARP及BA

3、X、cleave-caspase-3、cleave-caspase-9、cleave-PARP的表達(dá)變化。
  (3)劃痕實(shí)驗(yàn)及Transwell小室檢測(cè)不同藥物分組對(duì)A549細(xì)胞侵襲及遷移能力的影響,Western blot法檢測(cè)細(xì)胞侵襲遷移相關(guān)蛋白MMP-2和MMP-9的表達(dá)。(4)計(jì)算機(jī)檢索Cochrane Library、PubMed、EMBase、中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)(CNKI)、中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)(CBM)、維普中文

4、期刊數(shù)據(jù)庫(kù)、萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù),納入LBP聯(lián)合化療對(duì)比順鉑聯(lián)合化療治療晚期NSCLC的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)(PCT),根據(jù)納入與排除標(biāo)準(zhǔn)篩選后,運(yùn)用改良后的Jadad量表評(píng)價(jià)納入文獻(xiàn)的方法學(xué)質(zhì)量,并采用Cochrane協(xié)作網(wǎng)提供的Rev Man5.2統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行Meta分析。
  結(jié)果:
 ?。?)CCK-8結(jié)果顯示不同的藥物分組可抑制A549細(xì)胞的增殖,并以bFGF單抗+LBP對(duì)肺癌A549細(xì)胞增殖作用最為明顯,流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)b

5、FGF單抗聯(lián)合LBP可抑制A549細(xì)胞周期的進(jìn)行,阻止細(xì)胞周期在G0/GI期。Western blot檢測(cè)結(jié)果表明bFGF單抗和LBP可下調(diào)細(xì)胞內(nèi)CDK4和cyclin D的表達(dá)。(2)流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示bFGF單抗,LBP單獨(dú)及聯(lián)合可誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡。DAPI染色激光共聚焦顯微鏡下發(fā)現(xiàn)可引起細(xì)胞核固縮、核裂解。Western blot結(jié)果表明bFGF單抗聯(lián)合LBP通過(guò)下調(diào)bcl-2、casepase-3、casepase-9、

6、PARP的表達(dá),上調(diào)BAX、cleave-casepase-3、 cleave-casepase-9、 cleave-PARP的表達(dá)來(lái)誘導(dǎo)A549細(xì)胞的凋亡。
 ?。?)劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell小室基質(zhì)膠實(shí)驗(yàn)顯示bFGF單抗,LBP單獨(dú)及聯(lián)合可抑制A549細(xì)胞侵襲遷移能力。Western blot檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)藥物作用后可下調(diào)MMP-2和MMP-9蛋白表達(dá)來(lái)阻斷細(xì)胞的侵襲遷移。
 ?。?)共納入11項(xiàng)RCT,合計(jì)724例患

7、者。Meta分析結(jié)果顯示,試驗(yàn)組患者的客觀緩解率[ RR=0.96,95%CI(0.79,1.16),P=0.65]、白細(xì)胞減少發(fā)生率[ RR=0.95.,95%CI(0.83,1.08),P=0.42]和血小板減少發(fā)生率[ RR=0.96,95%CI(0.80,1.15),P=0.68]與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;但試驗(yàn)組患者惡心嘔吐發(fā)生率[RR=0.55,95%CI(0.46,0.64),P<0.05]、腹瀉發(fā)生率[ RR=0.4

8、3,95%CI(0.31,0.61),P<0.05]顯著低于對(duì)照組,兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
  結(jié)論:
 ?。?)bFGF單抗聯(lián)合LBP作用于細(xì)胞48h后可抑制肺腺癌A549細(xì)胞的增殖,阻止細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期、G2期進(jìn)入M期,其作用機(jī)制可能是下調(diào)細(xì)胞內(nèi)CDK4和cyclin D的表達(dá)發(fā)揮生物學(xué)作用。
  (2)bFGF單抗聯(lián)合LBP作用于細(xì)胞48h后可促進(jìn)肺腺癌A549細(xì)胞的凋亡,形態(tài)學(xué)觀察可以看到引起細(xì)胞核固縮

9、、核裂解,其機(jī)制可能與改變細(xì)胞內(nèi)PI3K/Akt信號(hào)通路,下調(diào)bcl-2、casepase-3、casepase-9、PARP的表達(dá),上調(diào)BAX、cleave-casepase-3、 cleave-casepase-9、 cleave-PARP的表達(dá)有關(guān)。
  (3)bFGF單抗和LBP單藥和聯(lián)合作用均可阻止肺腺癌A549細(xì)胞的轉(zhuǎn)移,兩藥聯(lián)合應(yīng)用對(duì)A549細(xì)胞具有協(xié)同作用。這一效應(yīng)可能與特異性的引起基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2和MMP

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