電針刺激對(duì)成年大鼠視神經(jīng)切斷后視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞存活的保護(hù)及機(jī)制探討.pdf

1、目的：研究不同穴位和頻率的電針刺激對(duì)成年大鼠視神經(jīng)切斷后視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（節(jié)細(xì)胞）存活的作用，并探討電針刺激對(duì)受損節(jié)細(xì)胞的保護(hù)機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)一：隨機(jī)選取54只SD大鼠，切斷右側(cè)視神經(jīng)并用熒光金（FluoroGold,FG）逆行性標(biāo)記節(jié)細(xì)胞后，隨機(jī)分為9組：對(duì)照組（含2、7和14d對(duì)照組）及不同穴位、頻率和傷后存活時(shí)間組合的電針組（含假穴4/20Hz電針7d組、百會(huì)穴4/20Hz電針7d組、睛明穴2Hz電針7d組、睛明穴4/20H

2、z電針2、7、14d組），每組6只動(dòng)物。對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)處死動(dòng)物取右眼視網(wǎng)膜后計(jì)數(shù)被熒光金標(biāo)記的節(jié)細(xì)胞并計(jì)算相應(yīng)的密度（細(xì)胞/mm2），數(shù)值用Mean±SEM表示。結(jié)果：（1）睛明穴4/20Hz電針7d組存活節(jié)細(xì)胞平均密度（1600±72）顯著高于對(duì)照（1104±41）、假穴（1222±68）和百會(huì)穴（1168±56）組（P<0.01），而假穴和百會(huì)穴組與對(duì)照組間無顯著性差異；（2）睛明穴2Hz與睛明穴4/20Hz電針7d組節(jié)細(xì)胞密度雖無顯著

3、性差異，但均顯著高于對(duì)照7d組（P<0.01）；（3）分別以4/20Hz電針刺激睛明穴2、7、14d，與對(duì)照組相同時(shí)間點(diǎn)相比，僅在傷后7d出現(xiàn)節(jié)細(xì)胞密度的顯著增高（P<0.01）。
　　實(shí)驗(yàn)二：隨機(jī)選取60只大鼠并隨機(jī)分為10組，即正常組、假手術(shù)2、7、14d組（手術(shù)暴露右側(cè)視神經(jīng)但不切斷），另外36只大鼠切斷右側(cè)視神經(jīng)后再隨機(jī)分為2、7、14d對(duì)照組和2、7、14d電針組（即2、7、14d睛明穴4/20Hz電針組），每組6只動(dòng)物

4、。于各組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)麻醉動(dòng)物后取動(dòng)物右眼收集房水，并利用高效液相色譜檢測(cè)其谷氨酸濃度（μmol/L），數(shù)值用Mean±SEM表示。結(jié)果：對(duì)照2、7、14d組（濃度分別為59.74±4.62、88.17±1.94、56.56±1.15）及電針2、7、14d組（濃度分別為47.62±4.29、54.72±1.98、52.27±1.16）房水谷氨酸濃度均顯著高于正常組及2、7、14d假手術(shù)組（濃度分別為43.54±0.53、43.71±0.66

5、、43.21±0.94、43.04±0.44）（P<0.01）；電針2、7d組房水谷氨酸濃度分別顯著低于對(duì)照組2、7d組（P<0.01）；電針14d組房水谷氨酸濃度與對(duì)照14d組無差異。
　　實(shí)驗(yàn)三：隨機(jī)選取54只大鼠切斷右側(cè)視神經(jīng)后，隨機(jī)分為6組：2、7、14d對(duì)照組和2、7、14d電針組（即2、7、14d睛明穴4/20Hz電針組），每組9只動(dòng)物。分別利用免疫組織化學(xué)染色、Western-blot方法檢測(cè)大鼠視網(wǎng)膜中分別參與谷氨

6、酸重吸收與代謝的谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體-1和谷氨酰胺合成酶的表達(dá)。結(jié)果：電針7d組谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體-1表達(dá)顯著高于對(duì)照7d組（P<0.05）；對(duì)照2、14d組分別與電針2、14d組的谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體-1表達(dá)無顯著差異。視神經(jīng)切斷后電針組和對(duì)照組谷氨酰胺合成酶表達(dá)沒有發(fā)生變化。
　　結(jié)論：切斷成年大鼠視神經(jīng)后每日以4/20Hz頻率的電針刺激睛明穴1次，可在傷后7d促進(jìn)視網(wǎng)膜谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體-1對(duì)傷側(cè)眼房水內(nèi)谷氨酸的重吸收，從而降低房水內(nèi)谷氨酸的含量，減輕