復方血竭凝膠制備工藝及質量分析研究.pdf

1、目的： 研制具有良好涂展性，含藥量高，穩(wěn)定性好的復方血竭凝膠制劑，對其進行提取工藝、制備工藝、質量標準、離體透皮試驗、影響因素試驗及復方指紋圖譜等研究。 方法： 1．提取工藝研究：以延胡索中有效成分延胡索乙素提取量作為考察指標，用高效液相色譜法測定延胡索乙素的含量，以萃取壓強、萃取溫度、萃取時間為影響因素，采用L9(34)正交試驗優(yōu)選延胡索SFE-CO2提取工藝；以當歸中有效成分揮發(fā)油和阿魏酸的提取量為考察指標，

2、用高效液相色譜法測定阿魏酸的含量，綜合評分，以萃取壓力、浸泡當歸的乙醇濃度、萃取時間、藥材粒度為影響因素，采用L9(34)正交試驗優(yōu)選當歸SFE-CO2提取工藝；以乳香揮發(fā)油提取量為考察指標，采用水蒸氣蒸餾法提取，以浸泡時間、加水量、提取時間為影響因素，采用L9(34)正交試驗優(yōu)選乳香揮發(fā)油提取工藝。 2．制劑成型工藝研究：在查閱文獻及預實驗的基礎上確定基質的種類及用量范圍，以制劑的均勻性、凝固性、手感、色澤、耐熱、耐寒情況等方

3、面作為考察指標進行綜合評分，采用L9(34)正交試驗優(yōu)選復方血竭凝膠基質的配比。 3．制劑質量標準研究：采用薄層色譜法對制劑中血竭、當歸、延胡索、乳香及冰片進行定性鑒別；采用HPLC法測定制劑中延胡索乙素的含量，色譜條件：色譜柱：AgilentZORBAXSBC18(4.6mm×250mm，5μm)，流動相：甲醇-0.1％磷酸溶液(三乙胺調(diào)pH值至6.0)(60：40)，流速：0.8mL·min-1，檢測波長：280nm，柱溫：

4、35℃；采用HPLC法測定制劑中阿魏酸的含量，色譜條件：色譜柱：ZORBAXSB-C18柱(5μm，4.6mm×250mm)，流動相：甲醇-0.3％冰醋酸(35：65)，流速：1.0mL·min-1，檢測波長：320nm，柱溫：35℃；按照2005年版《中國藥典》一部附錄ⅠQ凝膠劑項下檢查方法，對制劑進行檢查。 4．離體透皮率研究：采用改良Fanz裝置進行離體透皮吸收試驗，用HPLC法測定接受液中延胡索乙素的含量，計算復方血竭凝

5、膠中延胡索乙素的小鼠離體透皮率。 5．影響因素試驗：參照《中藥、天然藥物穩(wěn)定性研究技術指導原則》，以制劑的性狀、鑒別、涂展性、延胡索乙素含量測定為考察項目，對復方血竭凝膠進行影響因素試驗。 6．指紋圖譜研究：以高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜為基礎，初步建立包括共有峰數(shù)、相似度及峰面積比值在內(nèi)的復方血竭凝膠指紋圖譜質量控制標準，并對10批樣品進行了檢測。 結果： 1．優(yōu)選的延胡索SFE-CO2提取工藝為：

6、延胡索藥材(20-60目)加適量的氨性乙醇液拌勻，密閉24h，95％的乙醇作為夾帶劑，萃取壓力25Mpa、溫度55℃，CO2流量為30L·h-1，萃取1.5h，該優(yōu)選提取工藝延胡索乙素轉移率為92.14％，優(yōu)于乙醇提取工藝，且得膏率僅有0.665％；優(yōu)選的當歸SFE-CO2提取工藝為：當歸藥材(20-60目)以75％的乙醇作為夾帶劑，萃取壓力30Mpa，萃取溫度60℃，萃取2h；優(yōu)選的乳香揮發(fā)油的提取工藝為：藥材(碾碎)加10倍量水，浸

7、泡1h，水蒸汽蒸餾法提取6h。 2．優(yōu)選的復方血竭凝膠藥物和基質配比為：血竭0.5％，卡波姆9401％，乙醇20％，丙二醇15％，三乙醇胺適量。 3．質量標準研究：制劑中延胡索、當歸、血竭、乳香、冰片的薄層鑒別方法圖譜清晰，方法簡便。制劑中延胡索乙素含量測定：線性范圍為0.1148μg～1.1480μg(r=0.9999)；精密度試驗：RSD=1.57％；重復性試驗：延胡索乙素平均含量0.1774mg·g-1，RSD=1

8、．79％；回收率試驗：平均加樣回收率為101.36％，RSD=2.01％。3批制劑中延胡索乙素含量分別為0.1782mg·g-1，0.1774mg·g-1，0.1737mg·g-1，RSD=1.38％。制劑中阿魏酸的含量測定：線性范圍為0.031μg～0.310μg(r=0.9999)；重復性試驗：阿魏酸平均含量0.085mg·g-1，RSD=1.71％；回收率試驗：平均加樣回收率為95.82％，RSD=2.01％。3批制劑中阿魏酸的含

9、量分別為0.0814mg·g-1，0.0782mg·g-1，0.0795mg·g-1，RSD=1.65％。本品的外觀、pH值、耐寒耐熱性等項目檢查符合規(guī)定。 4．離體透皮率研究：將復方血竭凝膠涂于用剃毛法處理過的小鼠皮膚，延胡索乙素12h的累計離體(小鼠)透皮吸收率為78.48％。 5．影響因素試驗研究結果表明：溫度對復方血竭凝膠制劑有明顯影響，濕度和強光照射無明顯影響。 6．復方指紋圖譜研究：建立了復方血竭凝膠