絲裂霉素-改性殼聚糖緩釋膜片的制備、性質(zhì)及生物學(xué)評價.pdf

1、目的:青光眼濾過術(shù)后眼內(nèi)壓降低效果的減少可能是由濾過泡瘢痕化引起的,該現(xiàn)象主要是因為結(jié)膜和鞏膜間瘢痕的形成導(dǎo)致。濾過泡瘢痕化與細(xì)胞增殖,特別是與成纖維細(xì)胞增殖有關(guān)。目前臨床上主要通過兩種方法來抑制瘢痕形成:一是在手術(shù)前后使用抗代謝藥物來提高手術(shù)成功率,這些藥物雖可延緩瘢痕形成,但因其毒副作用易引起較多的并發(fā)癥及組織損傷；二是在手術(shù)中使用植入物,機械隔離鞏膜瓣和鞏膜床,避免或減少纖維粘連,保持濾過通道通暢,但其應(yīng)用受到免疫學(xué)反應(yīng)、材料來源

2、及其他因素的限制。因此,目前提高青光眼濾過手術(shù)成功率的主要手段之一就是植入物與抗代謝藥物的結(jié)合。理想的青光眼濾過手術(shù)植入材料應(yīng)該安全、生物相容性良好、易于操作,且具有降低眼內(nèi)壓的效果。殼聚糖的優(yōu)良生物學(xué)特性使其在醫(yī)藥、生物材料等領(lǐng)域已有較多的研究和應(yīng)用。在本實驗中,選擇臨床上常用的可顯著地抑制成纖維細(xì)胞增殖的藥物——絲裂霉素C。目的是制備絲裂霉素-Ⅳ-琥珀?；u乙基殼聚糖載藥緩釋膜片,研究其性質(zhì),評價其在體外實驗中對成纖維細(xì)胞的抑制作用

3、及生物相容性、生物降解性,評價其作為青光眼濾過手術(shù)植入物的可行性。
　　 方法
　　 1.制備并純化羥乙基殼聚糖(HECTS),通過脫乙酰度、羥乙基取代度、分子量、紅外圖譜等對其物理化學(xué)性質(zhì)進行表征；通過細(xì)胞毒性測定,評價其生物相容性。
　　 2.琥珀酸酐與HECTS通過開環(huán)反應(yīng)制備出N-琥珀酰化羥乙基殼聚糖(Suc-HECTS),考察不同條件下產(chǎn)物的琥珀?；?確定最佳反應(yīng)條件；對制得的Suc-HECTS進行結(jié)

4、構(gòu)分析,核磁氫譜法計算琥珀酰化度,并通過細(xì)胞毒性測定,評價其生物相容性。
　　 3.Suc-HECTS與MMC通過EDC·HCl催化進行脫水縮合反應(yīng),并用BDDGE進行分子間交聯(lián),避光條件下制備出3種不同交聯(lián)程度的絲裂霉素-N-琥珀?；u乙基殼聚糖(MMC-Suc-HECTS)載藥緩釋膜片；通過測定膜片的紅外圖譜、吸水率和溶脹比、通透性、藥物體外緩釋速度等研究其理化性質(zhì)；通過進行皮下刺激試驗、皮下植入和肌肉植入試驗、對成纖維細(xì)胞

5、生長影響試驗,分別評價膜片的生物相容性、降解性和抑制成纖維細(xì)胞生長的性質(zhì)。
　　 結(jié)果
　　 1.制備了取代位在C6-OH上、羥乙基結(jié)合率為3.14的HECTS,細(xì)胞相容性良好,無細(xì)胞毒性。
　　 2.制備了琥珀?；燃s為40％的Suc-HECTS,并確定了最適反應(yīng)條件,細(xì)胞相容性良好,無細(xì)胞毒性。3、制備了MMC-Suc-HECTS載藥緩釋膜片；膜片在體外有一定的藥物緩釋能力,具有良好的通透性及親水性,對體外培