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文檔簡介
1、目的:研究α-鵝膏毒肽(α-amanitin AMA)是否對正常小鼠肝細胞存在致凋亡作用以及是否存在劑量和時間效應關系,初步探討α-鵝膏毒肽致肝損害的機理.方法:4~6周齡健康雄性昆明小白鼠隨機抽樣分組,共2組:空白對照組(腹腔注射生理鹽水)、實驗組(腹腔注射AMA);實驗組①根據注射AMA劑量不同分為3個劑量亞組:0.8mg/kg亞組、1.2mg/kg亞組、2.0mg/kg亞組,于注射后24小時觀察;②AMA(2.0mg/kg)組根據
2、注射后觀察時間點不同分為3個時間亞組:16小時亞組、24小時亞組、36小時亞組.空白對照組和實驗組的各亞組中每組5只小鼠,各組小鼠經上述處理后分批處死,取肝臟組織進行檢測:肝組織切片HE染色光學顯微鏡和鈾鉛雙重染色透射電鏡觀察肝細胞形態(tài)學改變;肝組織勻漿提取DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測;末端脫氧核糖轉移酶介導的dUTP生物素末端標記法(TUNEL)檢測小鼠肝細胞凋亡的數量和凋亡指數(apoptotic index AI),采用SPSS11.
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