姜黃素對新生大鼠壞死性小腸結(jié)腸炎模型的療效評價及其機(jī)制的研究.pdf

1、第一部分新生大鼠腸組織Toll樣受體4的表達(dá)水平與壞死性小腸結(jié)腸炎發(fā)生率的關(guān)系研究
　　 目的：
　　 觀察不同日齡大鼠腸組織TLR4的表達(dá)情況及NEC發(fā)病情況，分析TLR4的表達(dá)量與壞死性小腸結(jié)腸炎發(fā)生率的關(guān)系。
　　 方法：
　　 將48只新生S-D大鼠隨機(jī)分為六組，分別為A組、B組、C組、D組、E組和F組。A組、B組及C組大鼠分別于第1、3、7天處死，處死的大鼠均取近回盲部腸組織做病理切片，采用免疫

2、組化法檢測TLR4的表達(dá)；D組、E組及F組分別于第1、3、7天采取缺氧復(fù)氧冷刺激+LPS灌胃+人工喂養(yǎng)三因素聯(lián)合方法建模，建模后空腹1天處死，處死的大鼠均取近回盲部腸組織做病理切片，采用HE染色觀察組織學(xué)變化、做組織損傷評分及NEC發(fā)生率統(tǒng)計。
　　 結(jié)果：
　　 大鼠腸組織TLR4的表達(dá)量A組：5.44±0.03>B組：5.22±0.24>C組：4.92±0.09，且各組之間比較均有統(tǒng)計差異（P<0.05）；D組、E組

3、及F組各組病理評分分別為D組：3.42±0.61>E組：2.47±0.39>F組：1.68±0.34，各組之間比較均有統(tǒng)計差異（P<0.05）；D組、E組及F組各組NEC的發(fā)病率分別為：D組：100％（8/8）>E組62.5％（5/8）E組>15％（2/8）。
　　 結(jié)論：
　　 新生大鼠腸粘膜有大量的TLR4表達(dá)，但是隨著日齡的增加，大鼠腸道TLR4表達(dá)呈顯著下降的趨勢，且隨著大鼠日齡的增加其NEC發(fā)生率也降低，故我們

4、推測：大鼠腸粘膜TLR4的表達(dá)量可能與NEC的發(fā)生有著密切的關(guān)系。
　　 第二部分姜黃素對新生大鼠壞死性小腸結(jié)腸炎動物模型的療效評估及其機(jī)制的研究
　　 目的：
　　 探討姜黃素作用于大鼠壞死性小腸結(jié)腸炎（NEC）模型的療效及其作用機(jī)制。
　　 方法：
　　 經(jīng)人工喂養(yǎng)、缺氧復(fù)氧冷凍及脂多糖灌胃后建立NEC動物模型。實驗共分4組，分別為正常對照組（A組）、NEC模型組（B組）、姜黃素干預(yù)組（C組）

5、及溶劑組（D組）。各組于第4天處死大鼠，取近回盲部腸組織做病理切片，采用HE染色觀察組織學(xué)變化并做組織損傷評分、免疫組化法檢測TLR4、NF-κB、p38 MAPK的表達(dá)。其它腸組織制備組織勻漿取上清用ELISA法檢測腫瘤壞死因子α（TNF-α）和白細(xì)胞介素-6（IL-6）的含量。
　　 結(jié)果：
　　 A，D組大鼠無NEC癥狀，B組大鼠出現(xiàn)典型的NEC癥狀，C組大鼠與B組相比NEC癥狀出現(xiàn)的較晚、較輕。B組與A，D組相比

6、腸組織病理學(xué)評分及NF-KB，TNF-α，IL-6的表達(dá)顯著增高（P<0.05）；C組與B組相比其表達(dá)顯著降低（P<0.05）。B、C組與A，D組相比腸組織TLR4的表達(dá)顯著降低（P<0.01），C組與B組相比其表達(dá)升高，但是無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 姜黃素干預(yù)對NEC大鼠具有一定的保護(hù)作用，其機(jī)制可能是抑制NF-KB、P38 MAPK、TNK-α及IL-6的表達(dá)從而發(fā)揮抗炎效應(yīng)。由于僅做了蛋白