雙歧桿菌對(duì)壞死性小腸結(jié)腸炎新生大鼠模型腸道損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：
　　探討雙歧桿菌對(duì)壞死性小腸結(jié)腸炎(necrotizing enterocolitis, NEC)新生大鼠模型腸道損傷的保護(hù)作用，并分析雙歧桿菌保護(hù)NEC腸道損傷可能的機(jī)制。
　　方法：
　　120只新生1日齡Sprague-Dawley(SD)大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為3組：對(duì)照組、壞死性小腸結(jié)腸炎新生大鼠組（NEC組）及雙歧桿菌干預(yù)壞死性小腸結(jié)腸炎新生大鼠組（NEC+BIF組），每組40只。3組分別于第1、2、

2、3天固定時(shí)間點(diǎn)行體質(zhì)量測(cè)量；實(shí)驗(yàn)過(guò)程中觀察大鼠一般情況變化，并統(tǒng)計(jì)死亡率；于第4天斷頭處死大鼠，HE染色觀察回盲部腸組織病理學(xué)變化并行雙盲法病理學(xué)評(píng)分，并統(tǒng)計(jì)NEC發(fā)生率；異硫氰酸熒光素-葡聚糖(FITC-Dextran)示蹤法檢測(cè)腸黏膜通透性；ELISA檢測(cè)血清Zonulin的水平；Western bloting及免疫組化檢測(cè)腸組織緊密連接蛋白的表達(dá)及分布；將3組大鼠血清Zonulin水平與腸道通透性及緊密連接蛋白表達(dá)量行相關(guān)性分析。

3、應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件，所有計(jì)量資料均以x?s表示，各組間比較行單因素方差分析法。分類(lèi)資料行卡方檢驗(yàn)法。相關(guān)性分析行皮爾森檢驗(yàn)法。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　與NEC組相比，雙歧桿菌干預(yù)后大鼠死亡率及NEC發(fā)生率均明顯降低，腸上皮損傷明顯改善，而與對(duì)照組相比，NEC組腸道通透性增高(P＜0.05)，血清Zonulin表達(dá)明顯增加(P＜0.05)，腸上皮緊密連接蛋白Claudin-1、Occlud

4、in、ZO-1的表達(dá)明顯減少(P＜0.05)，且分布不連續(xù)；與NEC組相比，NEC+BIF組腸道通透性降低(P＜0.05)，血清Zonulin表達(dá)降低(P＜0.05)，腸上皮緊密連接蛋白的表達(dá)增加(P＜0.05)。相關(guān)性分析顯示，3組大鼠血清Zonulin水平與腸道通透性呈正相關(guān) r=0.923， P＜0.01，而血清 Zonulin水平與腸組織緊密連接Claudin-1、Occludin、ZO-1蛋白表達(dá)量均呈負(fù)相關(guān)，分別為r=-0.

5、779， P＜0.01；r=-0.920，P＜0.01；r=-0.619，P＜0.01。
　　結(jié)論：
　　1.建立穩(wěn)定的壞死性小腸結(jié)腸炎新生大鼠模型；
　　2.壞死性小腸結(jié)腸炎新生大鼠模型腸損傷明顯，腸道通透性增高，血清Zonulin蛋白釋放升高；
　　3.雙歧桿菌可明顯改善壞死性小腸結(jié)腸炎新生大鼠的腸損傷；
　　4.雙歧桿菌改善壞死性小腸結(jié)腸炎新生大鼠腸道損傷的可能機(jī)制包括降低血清Zonulin蛋白釋放，