GOLPH3在卵巢癌組織中的表達(dá)及作用機(jī)制的初步研究.pdf

1、背景
　　卵巢癌(ovarian carcinoma，OC)是女性生殖系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤，早期不易發(fā)現(xiàn)，一旦發(fā)現(xiàn)常常已屬晚期。上皮性卵巢癌(Epithelial Ovarian Cancer，EOC)是卵巢癌中最常見(jiàn)的一種類(lèi)型，是婦科腫瘤中死亡率最高的一種類(lèi)型。目前卵巢癌的常規(guī)治療仍然是手術(shù)、化療、放療和內(nèi)分泌治療等措施，但這些治療方法都存在著療效不佳的問(wèn)題。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，腫瘤分子的靶向治療成為眾多學(xué)者關(guān)注的熱點(diǎn)，基因干擾

2、技術(shù)正逐步用于目的基因及相關(guān)基因的作用機(jī)制的研究。高爾基體磷蛋白3(GOLPH3)是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一種癌基因，在多種實(shí)體腫瘤中存在過(guò)表達(dá)，并與腫瘤的臨床分期、腫瘤病理分級(jí)及轉(zhuǎn)移侵襲密切相關(guān)。GOLPH3在多種生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮作用，參與多種惡性腫瘤的發(fā)展過(guò)程，其高表達(dá)多與不良的臨床預(yù)后有關(guān)，而GOLPH3在卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展中的作用機(jī)制目前還不清楚。
　　目的
　　本課題旨在研究GOLPH3在卵巢漿液性囊腺癌組織中的表達(dá)及其與臨

3、床病理特征之間的關(guān)系，并利用基因干擾技術(shù)初步探討GOLPH3在卵巢癌細(xì)胞生物學(xué)行為方面的的作用機(jī)制，闡明GOLPH3在卵巢癌發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的作用。
　　方法
　　1.應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、蛋白印記法(Western blot)分別檢測(cè)各組織標(biāo)本中GOLPH3在mRNA和蛋白水平的表達(dá)，并與患者臨床病理特征進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　2.構(gòu)建針對(duì)人GOLPH3基因的shRNA表達(dá)質(zhì)粒(GOLPH3-shRNA)，轉(zhuǎn)染人卵巢

4、癌SW626細(xì)胞系，使GOLPH3基因沉默。
　　3.利用CCK-8、細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)及Transwell小室法檢測(cè)GOLPH3-shRNA轉(zhuǎn)染后對(duì)SW626細(xì)胞增殖、遷移及侵襲能力的影響。
　　結(jié)果
　　1.GOLPH3 mRNA在卵巢漿液性囊腺癌組織中的表達(dá)高于卵巢囊腺瘤組(2.33-7.34倍)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。GOLPH3蛋白在卵巢漿液性囊腺癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率(73.8％)明顯高于卵巢囊腺瘤

5、組(35.71％)(P＜0.01)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.GOLPH3蛋白陽(yáng)性表達(dá)與漿液性囊腺癌的臨床分期(p=0.019)、病理分級(jí)(p=0.042)及有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(p=0.000)有關(guān)，而與患者的年齡（p=0.881）無(wú)關(guān)(P＞0.05);并且腫瘤細(xì)胞的分化程度越低其GOLPH3蛋白表達(dá)量越高(P＜0.01)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中干擾質(zhì)粒轉(zhuǎn)染48小時(shí)后SW626細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率約為75％，干擾

6、組的GOLPH3的mRNA及蛋白表達(dá)水平的表達(dá)均明顯下調(diào)(P＜0.01)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4.干擾組腫瘤細(xì)胞的增殖能力受抑制(P＜0.01)，且這種抑制作用與時(shí)間無(wú)關(guān);卵巢癌腫瘤細(xì)胞的克隆形成能力降低(P＜0.01);卵巢癌腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移及侵襲能力亦明顯降低(P＜0.01)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論
　　1.GOLPH3在卵巢漿液性囊腺癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用。
　　2.GOLPG3促進(jìn)卵