細(xì)胞周期相關(guān)激酶在卵巢癌中的作用及作用機(jī)制的研究.pdf

1、細(xì)胞周期相關(guān)激酶(cell cycle—related kinase，CCRK)具有促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用，但對(duì)其作用機(jī)制目前還有爭(zhēng)議。為了研究CCRK在卵巢癌發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的作用及可能機(jī)制，我們利用組織芯片進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)CCRK在正常卵巢組織、卵巢良性囊腺瘤、卵巢交界性腫瘤和卵巢癌組織中的表達(dá)情況；利用反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)和免疫印跡法(Western blotting)檢測(cè)正常卵巢組織和卵巢痛組織中以及卵巢癌細(xì)胞株中CCRK表達(dá)情

2、況；利用RNA干擾的方法下調(diào)卵巢癌細(xì)胞H0-8910和OVCAR—3中CCRK，觀(guān)察了CCRK下調(diào)后細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的改變；觀(guān)察了TOV—21G細(xì)胞在CCRK過(guò)表達(dá)后的細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期及細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)生長(zhǎng)能力的變化；最后用免疫印跡法檢測(cè)了與細(xì)胞增殖及細(xì)胞周期相關(guān)的一些分子蛋白水平的改變。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與正常卵巢組織相比，卵巢腫瘤組織中CCRK表達(dá)明顯上調(diào)，從卵巢良性囊腺瘤、卵巢交界性腫瘤到卵巢癌組織CCRK表達(dá)上調(diào)比例逐漸升高；CCRK

3、表達(dá)上調(diào)與卵巢癌患者臨床病理特征密切相關(guān)，在卵巢癌組織學(xué)分型中，未分化型上調(diào)比例最高(72％)，在組織學(xué)分級(jí)中，G3級(jí)上調(diào)比例最高(67％)，臨床分期越晚CCRK上調(diào)比例越高；CCRK表達(dá)上調(diào)與患者預(yù)后密切相關(guān)；在被檢測(cè)的5株卵巢癌細(xì)胞中，CCRK均有表達(dá)，但其表達(dá)水平不一致；用RNA干擾的方法下調(diào)卵巢癌細(xì)胞H0-8910和OVCAR—3中CCRK可以抑制細(xì)胞體外增殖及引起細(xì)胞周期G1期阻滯，但并不引起細(xì)胞凋亡；過(guò)表達(dá)CCRK可以促進(jìn)卵

4、巢癌細(xì)胞TOV—21G的體外增殖和細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期；過(guò)表達(dá)CCRK可以顯著促進(jìn)TOV—21G移植瘤在裸鼠體內(nèi)的生長(zhǎng)；用RNA干擾的方法下調(diào)卵巢癌細(xì)胞H0-8910中CCRK可以在mRNA和蛋白水平顯著降低細(xì)胞周期蛋白D1表達(dá)水平；過(guò)表達(dá)CCRK可以使卵巢癌細(xì)胞TOV21G中細(xì)胞周期蛋白D1輕度升高。因此，我們認(rèn)為卵巢癌中CCRK表達(dá)上調(diào)是卵巢癌患者預(yù)后不良的一個(gè)標(biāo)志；CCRK在卵巢癌發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中具有癌基因的作用，有可能成為卵巢癌