瘤胃內(nèi)灌注乙酸對山羊瘤胃內(nèi)環(huán)境及真胃壁M2、M3和eNOS的基因表達(dá)影響.pdf

1、隨著反芻動物集約化、規(guī)模化養(yǎng)殖，通過飼喂高精飼料提高生產(chǎn)性能的同時也易造成反芻動物胃腸功能的紊亂，奶牛真胃變位就是其中的疾病之一?，F(xiàn)在普遍認(rèn)為，日糧中添加大量精料是誘發(fā)真胃變位的重要原因。過量精料在瘤胃中發(fā)酵產(chǎn)生大量揮發(fā)性脂肪酸(VFA)，其中乙酸約占總VFA的70％-75％。不能被瘤胃吸收的VFA進(jìn)入真胃，導(dǎo)致真胃收縮減弱、運(yùn)動遲緩，這可能是發(fā)生真胃變位的病理學(xué)基礎(chǔ)。
　　為了探究乙酸在反芻動物真胃變位中的作用機(jī)制，本試驗(yàn)以成年

2、雜交母山羊?yàn)樵囼?yàn)動物，通過瘺管向瘤胃內(nèi)灌注不同劑量的乙酸溶液，觀察山羊血液理化指標(biāo)、瘤胃內(nèi)環(huán)境(pH、VFA濃度)和真胃胃底壁組織結(jié)構(gòu)以及真胃組織M2、M3和eNOS的基因mRNA表達(dá)水平變化。試驗(yàn)方法:16只體重30-40 kg雜交母山羊隨機(jī)分成4個組:對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組，每組每只山羊安裝永久性瘤胃瘺管。經(jīng)瘤胃瘺管，試驗(yàn)組分別每天灌注0.5 g/kg、1.0 g/kg、2.0g/kg乙酸溶液，對照組灌注等體積生理鹽水

3、，連續(xù)灌注一周。每天灌注后4h采集血液、瘤胃液，做血常規(guī)、血液生化、瘤胃液pH、瘤胃液VFA濃度檢測;試驗(yàn)一周后，無菌手術(shù)采集真胃組織做石蠟切片（HE染色），用熒光定量PCR法測定真胃壁M2、M3和eNOS的基因表達(dá)水平。結(jié)果如下:
　　(1)瘤胃內(nèi)灌注乙酸溶液后，血液RBC和WBC與對照組相比，無顯著差異(P＞0.05)。中、高劑量組血清AST活性升高，顯著高于對照組(P＜0.01)，且超出正常生理范圍;中、高劑量組血清ALT活

4、性顯著高于對照組，其中，高劑量組出現(xiàn)極顯著升高（P＜0.01）;血清ALP活性以及BUN、CREA和Ca的含量與對照組相比無顯著差異(P＞0.05)。
　　(2)瘤胃內(nèi)灌注乙酸溶液后，低、中劑量組真胃胃底壁組織結(jié)構(gòu)完整，腺體排列緊密，各層組織結(jié)構(gòu)清晰，與對照組相比，未見明顯差異。高劑量組真胃胃底壁黏膜上皮細(xì)胞嗜酸性增強(qiáng)，核溶解，固有層腺體分布稀疏，黏膜下層變薄。
　　(3)瘤胃內(nèi)灌注乙酸溶液后，低、中劑量組瘤胃液pH值與對照

5、組相比，無顯著差異（P＞0.05）;高劑量組瘤胃液pH值降低，顯著低于對照組（P＜0.01）。瘤胃內(nèi)乙酸濃度升高，顯著高于對照組（P＜0.05），其中，中、高劑量組極顯著高于對照組(P＜0.01);低、中劑量組瘤胃內(nèi)丙酸和丁酸的濃度與對照組相比，無顯著差異（P＞0.05）;高劑量組瘤胃內(nèi)丙酸和丁酸的濃度降低，極顯著低于對照組（P＜0.01）。
　　(4)瘤胃內(nèi)灌注乙酸溶液后，低劑量組真胃壁全層組織中M2和M3的mRNA水平上調(diào)，但

6、與對照組相比無顯著差異（P＞0.05）;中、高劑量組M2和M3的mRNA水平下調(diào)，與對照組相比，中劑量組無顯著差異(P＞0.05)，高劑量組顯著下調(diào)（P＜0.05）;與對照組相比，各試驗(yàn)組eNOS mRNA水平均上調(diào)，其中，低劑量組顯著上調(diào)(P＜0.05)，中、高劑量組極顯著上調(diào)(P＜0.01)。在真胃壁黏膜層組織中，與對照組相比，低劑量組M2和M3的mRNA水平上調(diào)，M2 mRNA水平顯著上調(diào)(P＜0.05)，但M3 mRNA水平上調(diào)

7、不顯著(P＞0.05);中、高劑量組M2和M3的mRNA水平下調(diào)，其中高劑量組M3 mRNA水平顯著下調(diào)(P＜0.05);與對照組相比，各劑量組eNOS mRNA水平均上調(diào)，其中低劑量組顯著上調(diào)(P＜0.05)，中劑量組極顯著上調(diào)(P＜0.01)，但高劑量組無顯著差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:瘤胃內(nèi)灌注乙酸溶液，未引起腎臟的明顯損傷，且未誘導(dǎo)全身性炎癥反應(yīng)，但造成了一定的肝臟損傷;高劑量的乙酸導(dǎo)致真胃黏膜損傷，抑制胃壁M2和M