瘤胃源酵母的分離、篩選及其對山羊瘤胃發(fā)酵的影響.pdf

1、酵母作為畜牧生產(chǎn)中一類重要的微生物添加劑，在反芻動物生產(chǎn)中得到了廣泛應用。為獲得對反芻動物生產(chǎn)更有應用價值的酵母菌種，本論文從奶牛和山羊瘤胃液中分離到94株酵母菌，通過比對這些菌株的生長速率及其對乳酸的利用能力，最終篩選出1株性能良好的酵母菌株;而后運用體外批次培養(yǎng)技術，評估了添加此株菌對瘤胃微生物發(fā)酵不同底物的特性的影響;在此基礎上，進一步研究了該酵母菌培養(yǎng)物對山羊瘤胃參數(shù)和飼料降解率的影響。論文分三部分進行。
　　1瘤胃源酵母

2、的分離篩選以及鑒定
　　本實驗擬分離篩選對乳酸利用能力強和生長速率快的瘤胃源酵母。實驗分別以山羊及奶牛瘤胃液為菌源，利用酵母選擇性培養(yǎng)基，通過分離篩選獲得94株疑似酵母菌株。通過乳酸利用能力測定、生長曲線測定和26S rDNA鑒定試驗，最終獲得1株生長速度較快的疑似酵母菌株。26S rDNA序列分析表明，上述分離出的疑似酵母菌株為Meyerozyma屬酵母菌株。結果表明，山羊及奶牛瘤胃液中存在多種酵母，并且這些酵母的乳酸利用能力和

3、生長速度不一致，部分菌株具有較快的生長速度與較強的利用乳酸的能力。
　　2菌株Y09對瘤胃微生物發(fā)酵不同底物能力的影響
　　實驗分別以羊草與精料混合物、馬鈴薯淀粉和玉米淀粉為底物，以奶牛瘤胃液為接種物，研究了上述酵母菌株對瘤胃微生物體外發(fā)酵參數(shù)的影響。結果表明，在以羊草和精料混合物為底物時，添加瘤胃源酵母顯著降低了發(fā)酵液pH和乳酸濃度(P＜0.001)，顯著提高了丙酸濃度和干物質消失率（P＜0.05）;以玉米淀粉為底物時，添

4、加該酵母菌顯著降低了發(fā)酵液pH和乳酸濃度(P＜0.001);以馬鈴薯淀粉為底物時，顯著降低了pH(P＜0.05)，提高了丙酸濃度(P＜0.05);但在上述三種底物條件下，添加酵母菌對發(fā)酵液中總產(chǎn)氣量、氨態(tài)氮、乙酸、丁酸、異丁酸、戊酸和異戊酸濃度無顯著影響(P＞0.05)。Real-time PCR測定結果表明，添加該酵母菌可顯著提高以羊草和馬鈴薯淀粉為底物時發(fā)酵液中總菌16S rDNA的挎貝數(shù)(P＜0.05)。結果說明，本研究分離獲取的

5、瘤胃源酵母可提高瘤胃微生物對羊草精料混合物的降解能力，降低羊草精料混合物組和玉米淀粉組發(fā)酵液中乳酸濃度，提示該菌株可能具有提高日糧消化利用效率、促進丙酸生成和瘤胃細菌生長的作用。
　　3添加Y09活性酵母對山羊瘤胃發(fā)酵與飼料消化率的影響
　　本實驗擬研究Y09活性酵母對山羊瘤胃發(fā)酵和飼料消化率的影響。實驗選用瘤胃源酵母菌種·Y09，采用固體發(fā)酵的方法制備酵母培養(yǎng)物(活菌數(shù)達5*108個/g)，實驗動物選取健康、體重相近的波雜

6、山羊14頭，隨機分為兩組，每組7頭，處理組在基礎日糧中添加10 g的活性酵母。結果表明，添加活性酵母顯著降低了飼喂前0h和飼喂后4h瘤胃內(nèi)乳酸濃度(P＜0.05)，提高了日糧粗蛋白消化率(P＜0.05)，但對山羊日增重、采食量、料重比和pH無顯著影響(P＞0.05)，對瘤胃氨態(tài)氮和TVFA濃度、乙丙比、有機物消化率、粗脂肪消化率、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維消化率也無顯著影響(P＞0.05)。采用Real-Time PCR定量測定結果表明