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1、第一部分:人可溶性低密度脂蛋白受體(sLDLR)在甲醇酵母中的表達及其拮抗劑篩選模型的構(gòu)建研究;該文在甲醇酵母體系中表達了人低密度脂蛋白受體配基結(jié)合結(jié)構(gòu)域(sLDLR),并建立了LDLR拮抗劑篩選模型.應(yīng)用RT-PCR方法,以人肝癌Bel-7402總RNA為模板擴增了編碼人sLKLR的基因片段,核苷酸序列分析表明與報道的LDLR cDNA序列相比只有一個同義突變.將目的的基因插入甲醇酵母表達質(zhì)粒pPIC9K的α-因子信號肽編碼基因序列下
2、游,將其線性化后用電穿孔法導(dǎo)入甲醇酵母(Pichia pastoris GS115).該研究在甲醇酵母中成功分泌表達了sLDLR、以受體配基競爭性結(jié)合為基礎(chǔ),建立了ELISA高通量篩選模型,國內(nèi)外未見相同報道.第二部分:人可溶性高密度脂蛋白受體(sHDLR)在甲醇酵母的表達;該文在甲醇酵母體系中表達了高密度脂蛋白受體胞外片段(sHDLR),并進行了sHDLR與其配體LDL和AcLDL的結(jié)合活性分析.應(yīng)用RT-PCR方法,以人肝癌Bel-
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