麻枳降濁方改善便秘型腸易激綜合征模型大鼠腸組織中5-HT的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　 應(yīng)用冰水灌胃法建立便秘型腸易激綜合征大鼠模型，給予麻枳降濁方中藥復(fù)方、復(fù)方蘆薈膠囊及西沙必利對(duì)該模型進(jìn)行干預(yù)，通過(guò)觀(guān)察大鼠的一般情況、體重、大便含水量、小腸推進(jìn)比、腸道的病理形態(tài)學(xué)變化以及腸道組織中5-HT的表達(dá)水平，來(lái)探討5-HT與便秘型腸易激綜合征的關(guān)系，以及麻枳降濁方中藥復(fù)方對(duì)便秘型腸易激綜合征大鼠腸道的保護(hù)作用和其作用產(chǎn)生的可能機(jī)制，為臨床上中醫(yī)藥治療便秘型腸易激綜合征提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:<

2、br>　　 健康雄性wistar大鼠45只，清潔級(jí)，體重140±20g，每只大鼠分籠獨(dú)立飼養(yǎng)，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周。觀(guān)察大鼠糞便形態(tài)和含水量，均為正常者用于實(shí)驗(yàn)。第二周將45只健康雄性wistar大鼠隨機(jī)分為造模組和正常組(N)，造模組37只，采用冰水灌胃方法造模;正常組8只，普通飼養(yǎng)、飲水。造模期給予每只造模大鼠2ml冰水混合物(0-4℃生理鹽水)灌胃，每日1次，從上午8:30開(kāi)始，共14天，正常飼食、飲水。造模成功（成功的標(biāo)準(zhǔn)是:糞便形

3、態(tài)、糞便質(zhì)地及含水量的改變）后將造模組隨機(jī)分為4組:西藥對(duì)照組(X)、中成藥對(duì)照組(Z)、麻枳降濁方組(F)、模型組(M)，每組各8只。模型成模一周后開(kāi)始給藥，藥物劑量按照體表面積換算，X組大鼠給予西沙必利3.6mg/kg/d灌胃，Z組大鼠給予復(fù)方蘆薈膠囊0.36g/kg/d灌胃，F(xiàn)組大鼠給予麻枳降濁方中藥配方顆粒6.3g/kg/d灌胃，M組大鼠給予蒸餾水2ml/d灌胃，N組大鼠不予灌胃，共2周。末次給藥后，大鼠禁食24h，正常飲水，準(zhǔn)

4、備留取標(biāo)本。試驗(yàn)開(kāi)始前30min，每只大鼠灌胃4ml碳末。采用斷頭取血法處死大鼠，處死后迅速開(kāi)腹取出全胃腸組織，用直尺測(cè)量從幽門(mén)到碳末前端的長(zhǎng)度，以及幽門(mén)到回盲部的距離。然后迅速取各組大鼠的回盲部、結(jié)腸(距肛門(mén)5cm)、小腸(距回盲部5cm)各0.5cm，立即用生理鹽水沖洗，10％的中性緩沖福爾馬林液固定。在光鏡下觀(guān)察腸道組織的病理改變，用免疫組化法觀(guān)察腸道組織5-HT的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1、實(shí)驗(yàn)大鼠的一般狀況

5、比較
　　 正常組大鼠精神良好，反應(yīng)敏捷，眼睛有神，肌肉豐滿(mǎn)，皮毛光澤柔順，尾不彎曲，無(wú)畸形，飲食正常，糞便呈麥粒狀，長(zhǎng)約0.9cm，黃褐色，糞便質(zhì)地較軟，易掰開(kāi)，尿量正常。造模組大鼠精神可，較緊張，反應(yīng)過(guò)激，眼睛有神，肌肉豐滿(mǎn)，皮毛稍干枯毛躁，尾不彎曲，無(wú)畸形，飲食正常，糞便多呈小黃豆?fàn)?，可與麥粒狀糞便夾雜相見(jiàn)，長(zhǎng)約0.4-0.6cm，灰褐色或灰白色，糞便質(zhì)地稍硬，個(gè)別不能掰開(kāi)，尿量正常。在試驗(yàn)過(guò)程中，不同階段均未見(jiàn)大鼠死亡，

6、整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中未見(jiàn)大鼠出現(xiàn)腹瀉情況。造模過(guò)程中，1只大鼠出現(xiàn)原發(fā)性右眼白內(nèi)障，1只大鼠逃逸過(guò)程中被鼠籠劃傷，為了減少影響因素，予以剔除。
　　 2、糞便含水量
　　 結(jié)果顯示:灌冰水14天后，造模組大鼠糞便含水量較正常組大鼠糞便含水量減低，證明造模成功。灌藥14天后，模型組大鼠糞便含水量較正常組低(P＞0.05)，復(fù)方蘆薈膠囊治療組大鼠、西沙必利治療組大鼠、麻枳降濁方治療組大鼠糞便含水量較模型組增高(P＜0.05)，各治

7、療組之間未見(jiàn)差異(P＞0.05)。
　　 3、小腸推進(jìn)比
　　 結(jié)果顯示:灌藥14天后，模型組大鼠小腸推進(jìn)比較正常組減低(P＜0.05)，復(fù)方蘆薈膠囊治療組大鼠、西沙必利治療組大鼠、麻枳降濁方治療組大鼠小腸推進(jìn)比較模型組均增高(P＜0.05)，各治療組大鼠小腸推進(jìn)比較正常組減低(P＜0.05)。
　　 4、腸道病理學(xué)形態(tài)觀(guān)察
　　 結(jié)果顯示:各組大鼠不同腸組織結(jié)構(gòu)清楚，粘膜層完整，均未見(jiàn)充血、水腫、炎細(xì)胞

8、浸潤(rùn)、糜爛及潰瘍等明顯異常。
　　 5、免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)腸道組織中5-HT的表達(dá)
　　 結(jié)果顯示:灌藥14天后，在小腸（距回盲部5cm）中:模型組大鼠腸組織中5-HT含量較正常組升高(P＜0.05)，復(fù)方蘆薈膠囊治療組大鼠、西沙必利治療組大鼠、麻枳降濁方治療組大鼠腸組織中5-HT含量較模型組減低(P＜0.05)，各治療組大鼠腸組織中5-HT含量較正常組升高(P＜0.05)，各治療組之間腸組織中5-HT含量未見(jiàn)差異(P

9、＞0.05)。
　　 在回盲部中:模型組大鼠腸組織中5-HT含量較正常組升高(P＜0.05)，復(fù)方蘆薈膠囊治療組大鼠、西沙必利治療組大鼠、麻枳降濁方治療組大鼠腸組織中5-HT含量較模型組減低（P＜0.05），各治療組大鼠腸組織中5-HT含量較正常組升高(P＜0.05)，各治療組之間腸組織中5-HT含量未見(jiàn)差異(P＞0.05)。
　　 在結(jié)腸(距肛門(mén)5cm)中:模型組大鼠腸組織中5-HT含量較正常組升高（P＜0.05），復(fù)

10、方蘆薈膠囊治療組大鼠、西沙必利治療組大鼠、麻枳降濁方治療組大鼠腸組織中5-HT含量較模型組減低(P＜0.05)，各治療組大鼠腸組織中5-HT含量較正常組升高(P＜0.05)，各治療組之間腸組織中5-HT含量未見(jiàn)差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1、便秘型腸易激綜合征大鼠成模后出現(xiàn)了糞便變小、質(zhì)地變硬及含水量減低的情況，治療后大鼠糞便形狀變大，質(zhì)地變軟，含水量明顯增加。
　　 2、麻枳降濁復(fù)方中藥能夠提高