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1、目的:探討缺血預(yù)處理對大鼠心肌TLR4和相關(guān)致炎細胞因子的影響。 方法:18只雄性Sprague-Dawley大鼠(350-400g)被隨機分為假手術(shù)對照組(Sham組)、缺血再灌注組(Ischemia reperfusion,IR組)和缺血預(yù)處理組(Ischemia precondition,IPC組),n=6。IR組:結(jié)扎左前降支動脈30min后,松開再灌注120min。IPC組:結(jié)扎左前降支5min,松開復(fù)灌5min,再扎
2、緊5min,如此反復(fù)4次,再扎緊30min,復(fù)灌120min。Sham組:直接手術(shù)暴露出心臟。成功制備上述三種動物模型后,收集動物血清和切取動脈結(jié)扎遠端心肌組織。分別采用逆轉(zhuǎn)錄-PCR和Western blot技術(shù)檢測大鼠心肌組織中Toll樣受體-4(TLR-4)在轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平的變化。采用酶聯(lián)免疫吸附法測定動物血清中致炎細胞因子TNF-α、IL-1β的含量。 結(jié)果:在RT-PCR中,TLR4心肌中的mRNA表達水平IPC組
3、0.43±0.08,IR組0.72±0.10,Sham組0.25±0.03,提示IPC組顯著低于IR組,差異有顯著性(p<0.01)。在Western blot技術(shù)中,TLR4的蛋白表達水平IPC組0.41±0.02,IR組0.54±0.04,Sham組0.21±0.03;提示IPC組表達水平明顯低于IR組(p<0.05)。在ELISA測定血清中TNF-α,IPC組25.57±4.89,IR組33.60±6.14,Sham組18.85±
4、3.23;在ELISA測定血清中IL-1αIPC組36.73±5.64,IR組48.22±6.73,Sham組23.38±5.46,提示TNF-α、IL-1β的水平IPC組顯著低于IR組,差異有顯著性(p<0.01)。 結(jié)論:大鼠心肌缺血再灌注損傷時TLR4及相關(guān)致炎細胞因子表達增高,提示存在炎性反應(yīng)。IPC可減輕炎性反應(yīng),對心肌缺血再灌注損傷具有一定的保護作用,其具體作用機制可能與IPC降低心肌中TLR4表達,繼而降低血清致炎
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