黃瓜的高效再生和根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、西北師范大學(xué)碩士學(xué)位論文黃瓜的高效再生和根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化姓名：陳麗梅申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：幸亨泰;蔡潤20040501—— 墮盟塑苧墨竺壹望要圭塑塑些查塹墮坌墨墼壟焦鱟垡S t u d y o n e f f i c i e n t r e g e n e r a t i o ns y s t e m a n d t r a n s f e rb yA g r o b a c t e r i u r n m e

2、 d i a t i o n i n t oc u c u m b e rA b s t r a c tC u c u m b e rp l a y s a D ．i m p o r t a n t r o l e i n v e g e t a b l e s u p p l y , b u t i t s q u a l i t y a n da g r i c u l t u r a ly i e l d t e n d s t

3、ob er e d u c e d c o n s t a n t l yb y v a r i o u sp l a n td i s e a s e s ．T r a d i t i o n a lm e t h o d o f b r e e d i n gh a sm a n y d i s a d v a n t a g e s ，s u c h a sl o n g p e r i o d ，l o we f f i c i

4、 e n c y , a n dc u c u m b e re x i s t ss e r i o u s h a m p e r o f s e x u a lh y b r i d i z a t i o n ．S o i ti sd i m c u l t t oo b t a i n t h es u p e r i o r c u l t i v a rw i t h h i 曲r e s i s t a n c e ．T

5、 h i ss t u d y u s e dc o t y l e d o n s o f S 0 5 ，S 0 6a se x p l a n t s ，e s t a b l i s h e da h i g h l y e f f i c i e n tr e g e n e r a t i o n s y s t e mo fc u c u m b e r , t h e ni n t r o d u c e d ／u c g

6、 e n e a n dA T T lg e n e i n t oC u c u m b e rt h r o u g hA g r o b a c t e r i u mm e d i a t i o n ．T h eA T T lg e n ee n c o d e sac y t o c h r o m eP 4 5 0o x i d a s er e c i u i r e df o rb i o s y n t h e s

7、i s ．I te n h a n c e st h ec u t i nS Oi t w i l li n c r e a s et h er i s i s t a n c et o d i s e a s e s ．T h ef a c t o r si n f l u e n c i n gr e g e n e r a t i o nr a t e a n dt r a n s f o r m a t i o nr a t e

8、w e r e d i s c u s s e d ．T h e r e s u l t sw e r e s u t n m a r i z e d a sf o l l o w s ：1 A d d A g N 0 3a n dA B A t ot h ei n d u c i n gm e d i u m ，t h ee x p l a n t sC a nr e g e n e r a t ea d v e n t i t i

9、o u ss h o o t s ．B yt h i sm e a n s ，i m p r o v et h er e g e n e r a t i o nr a t ea n dN o ．o f s h o o t sp e re x p l a n t ．T oS 0 5 ．t h e b e s ti n d u c i n gm e d i u m i sM S + B A 2 ．0 m g 。L ～+ A B A l ．O

10、 m g ‘L q + A g N 0 3 2 ．0 m g ·L ’l ；T o S 0 6 ，M S + B A l ．5 m g ·L ‘1 + A B A O ．5 m g ·L ～+ A g N 0 3 2 ．0 m g ·L —i s t h eb e s t ．T h e r e g e n e r a t i o n r a t ea r e8 1 ．6 ％a n d9 1 ．2

11、％r e s p e c t i v e l y ．2 C e f o t a x i m e p r o m o t e s s h o o t o r g a n o g e n e s i s ，b u tc a r b e n i c i l l i np r e v e n t s i n v e r s e l y ．S o w e u s e4 0 0 m g 。L ～C e f o t a x i m e t Oe l

12、i m i n a t e A g r o b a c t e r i u m ．3 T h eo p t i m u mp r o c e d u r e i n c u c u m b e rt r a n s f o r m a t i o n a s f o l l o w s S 0 5 ：T h ec o t y l e d o n sw e r ep r e c u l t u r e df o r2d a y s ，i

13、n f e c t e d 15m i n ，C O - c u l t i v a t e df o r3d a y si ni n d u c i n gm e d i u m ．S 0 6 ：T h ec o t y l e d o n sw e r e p r e c u l t u r e df o r1 d a y , i n f e c t e d2 0m i n ，C O ．c u l t i v a t e df o

14、r3 d a y s i ni n d u c i n g m e d i u m ．4 D e t e c t i o n o f t r a n s f o r m i n gr e g e n e r a t e dc u c u m b e r W e u s e d 日C R t od e t e c tt h et r a n s f o r m i n gp l a n t l e t s ．2 0p l a n t so