-80℃非程序降溫凍存外周造血干細胞進行自體移植的研究.pdf

1、研究背景及目的:
　　造血干細胞移植是目前治療惡性血液病和多種實體瘤的有效方法,其中干細胞凍存是重要環(huán)節(jié)之一,自體移植甚至一部分異基因移植都需要用到凍存技術(shù),凍存是保證干細胞活性和增殖能力的重要手段。較為經(jīng)典的凍存方式是:程序控制降溫,降溫后再-196℃液氮保存,過程繁瑣,需要復(fù)雜的儀器設(shè)備,花費較高,但凍存效果好、時間長。解放軍總醫(yī)院血液科采用-80℃的冰箱深低溫凍存外周造血干細胞,該方式所需設(shè)備簡單,冷凍費用低。本文總結(jié)了10

2、4例自體移植的病例,采用簡易凍存方式,中位凍存時間為30.5天,本文旨在通過觀察:凍存前后細胞活性,CD34+細胞、單個核細胞的回收率,以及CD34+細胞、單個核細胞回收率的影響因素,解凍回輸后臨床植入情況,以及對于植入的影響因素,評價這種凍存方式的優(yōu)劣,從各個方面指導(dǎo)臨床,以達到更好的移植效果。
　　實驗共分為兩部分,具體如下。
　　第一部分:-80℃非程序降溫凍存外周造血干細胞關(guān)于細胞活性,CD34+細胞、單個核細胞回收

3、率以及影響因素的觀察
　　方法:回顧解放軍總醫(yī)院血液科自2004年2月至2010年5月,惡性血液系統(tǒng)腫瘤,行自體造血干細胞移植的病例,共104例,動員化療后采集干細胞,以5％的二甲基亞砜,羥乙基淀粉、人血白蛋白為凍存保護劑,采用非程控降溫方式。中位凍存時間是30.5天。觀察復(fù)蘇后細胞活性,CD34+細胞及單個核細胞的回收率。
　　結(jié)果:復(fù)蘇后細胞活性為94%,CD34+細胞回收率86%,單個核細胞回收率80.3%,三者較凍存

4、前均下降,前兩者有統(tǒng)計學(xué)意義。凍存時間超過半年的有2例,這2例均獲得了與短時間凍存相當?shù)募毎钚?、CD34+細胞數(shù)和單個核細胞數(shù)。
　　結(jié)論:5%DMSO為凍存保護液,非程序降溫保存于-80℃,CD34+細胞及單個核細胞的回收率高,凍存效果好,不良反應(yīng)發(fā)生率僅7.7%?；煷螖?shù)多及放療均明顯影響干細胞質(zhì)量。
　　第二部分:-80℃非程序降溫凍存外周造血干細胞行自體移植后造血重建以及影響
　　方法:觀察104例自體造血干

5、細胞移植患者,經(jīng)非程序-80℃深低溫冰箱凍存外周造血干細胞后的植入情況,以及 CD34+細胞輸注量對植入的影響,以及不同診斷、年齡、是否放療、化療次數(shù)、性別各組之間是否有差異。
　　結(jié)果:白細胞植入中位時間12天(8-20),血小板植入中位時間14天(5-63), CD34+細胞的輸注量以及 CD34+/MNC比值與粒系植入時間均呈線性關(guān)系,但與血小板植入均未呈線性關(guān)系,凍存時間與粒系及血小板植入也不呈線性關(guān)系,不同性別、年齡、是