Lin28B在正常妊娠胎盤組織中的表達及意義.pdf

1、目的：
　　滋養(yǎng)細胞的生物學(xué)行為受到嚴(yán)格的時空調(diào)控，一旦其調(diào)控機制失調(diào)，就可能導(dǎo)致流產(chǎn)、子癇前期、胎兒生長受限、滋養(yǎng)細胞腫瘤等疾病的發(fā)生。目前已有研究表明，Lin28B高表達于胚胎干細胞，隨細胞分化而逐漸低表達于分化細胞和成體組織，參與了機體的正常發(fā)育、體細胞的逆分化及腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。本課題通過檢測Lin28B在正常妊娠組織不同階段的胎盤組織滋養(yǎng)細胞中的表達，分析Lin28B在不同妊娠階段胎盤組織滋養(yǎng)細胞中的表達差異，從而探討其

2、在正常妊娠胎盤發(fā)育中的作用，為進一步研究滋養(yǎng)細胞生物學(xué)行為異常相關(guān)疾病的分子機制提供理論基礎(chǔ)。
　　方法：
　　1.正常妊娠不同時段絨毛或胎盤組織滋養(yǎng)細胞中Lin28B基因mRNA表達水平初步研究
　　收集2012年7月至2013年3月于中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院婦產(chǎn)科門診及病房就診的74例正常孕婦的絨毛和胎盤組織，其中包括正常妊娠早期組（5周＜孕周≤13周+6，n=31）、正常妊娠中期組(14≤孕周≤27周+6，n=1

3、3)和正常妊娠晚期組(28周≤孕周＜41周，n=30)。應(yīng)用RT-qPCR方法檢測各組絨毛或胎盤組織中基因Lin28BmRNA的表達情況。統(tǒng)計結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，應(yīng)用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析，多組均數(shù)間的比較用單因素方差分析（OneWay-ANOVA分析），認為P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2.正常妊娠不同時段絨毛或胎盤組織中Lin28B蛋白表達研究
　　采用WesternBlot和免疫組化方法檢測各組絨毛或胎

4、盤組織滋養(yǎng)細胞中Lin28B蛋白的表達。采用免疫組化檢測Lin28B在胎盤組織中的表達定位和水平。用QuantityOne軟件測定WesternBlot條帶灰度值，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示灰度值，組間比較采用單因素方差分析(ANOVA);免疫組化用H檢驗、U檢驗、卡方檢驗。用spss17.0軟件進行統(tǒng)計分析，認為P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1、在不同妊娠時期的絨毛和胎盤組織滋養(yǎng)細胞中均可檢測到Lin28BmRNA的

5、表達，免疫組化顯示Lin28B蛋白在合體滋養(yǎng)細胞和細胞滋養(yǎng)細胞均有表達，在細胞漿和細胞核中均可以檢測到Lin28B的免疫信號。在合體滋養(yǎng)細胞胞漿中的表達明顯強于細胞滋養(yǎng)層細胞，這種表達差異在妊娠早期絨毛組織中更為明顯。
　　2.RT-qPCR顯示Lin28BmRNA表達量在各組的有顯著差異(P＜0.05)，孕早期組表達量明顯低于孕中期和孕晚期組(P＜0.05)，孕中期組表達量明顯高于孕晚期組(P＜0.05)。對早孕期不同周數(shù)與Li

6、n28BmRNA的表達量進行相關(guān)性分析，Lin28B的表達與孕周成正相關(guān)(R=0.343，P＜0.05)。
　　3.免疫組化和WesternBlot顯示不同妊娠時期絨毛組織或胎盤組織滋養(yǎng)細胞中Lin28B蛋白的表達有顯著差異(P＜0.05)。妊娠早期表達高于妊娠中期組，妊娠中期組的表達高于妊娠晚期組，隨著孕周的增加，Lin28B的表達呈逐漸下降趨勢。
　　結(jié)論：
　　本研究顯示，在正常妊娠不同時期絨毛和胎盤組織中Lin