祛淤退翳膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、第一部分祛淤退翳膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究 目的：建立祛淤退翳膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為祛淤退翳膠囊的質(zhì)量控制提供法定分析方法和理論依據(jù)。 方法：(1)性狀：根據(jù)多批樣品的實(shí)際性狀描述。(2)鑒別試驗(yàn)：采用薄層色譜法分別鑒別本處方中的藥材。(3)檢查試驗(yàn)：根據(jù)《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄IL膠囊劑項(xiàng)下的制劑通則，分別檢查水分、裝量差異、崩解時(shí)限、微生物限度，并檢查制劑中所含的重金屬、砷鹽。(4)含量測(cè)定：用高效液相色譜法測(cè)定赤芍中芍

2、藥苷的含量，用薄層色譜法測(cè)定黃芪中黃芪甲苷的含量。(一)芍藥苷的含量測(cè)定：①選擇檢測(cè)波長(zhǎng)：采用UV光譜掃描法確定芍藥苷的最大吸收波長(zhǎng)。②色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：調(diào)整流動(dòng)相的組成、配比、流速，使芍藥苷色譜峰分離度、理論塔板數(shù)、不對(duì)稱因子符合要求。③供試品溶液的制備：優(yōu)選提取溶劑、提取時(shí)間、溶劑用量，確定最佳的樣品前處理方法。④方法學(xué)考察：進(jìn)行空白試驗(yàn)、標(biāo)準(zhǔn)曲線、精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性和回收率試驗(yàn)。⑤樣品中芍藥苷的含量限度：根據(jù)赤芍藥材中芍藥苷

3、的轉(zhuǎn)移率，初步制訂本品所含赤芍按芍藥苷計(jì)的最低含量限度。(二)黃芪甲苷的含量測(cè)定：①選擇掃描波長(zhǎng)：采用薄層光譜掃描法調(diào)整展開(kāi)劑的組成和配比，使黃芪甲苷的分離效果比較理想，確定掃描波長(zhǎng)。②供試品溶液的制備：用超聲、萃取、堿洗等方法處理樣品，考察影響TLC測(cè)定的主要因素如提取時(shí)間、萃取次數(shù)等。③方法學(xué)考察：進(jìn)行空白試驗(yàn)、標(biāo)準(zhǔn)曲線、穩(wěn)定性、同板精密度、異板精密度、儀器精密度、回收率試驗(yàn)。④黃芪甲苷的含量限度：根據(jù)黃芪藥材中黃芪甲苷的轉(zhuǎn)移率，初

4、步制訂本品所含黃芪按黃芪甲苷計(jì)的最低含量限度。(5)穩(wěn)定性的考察：對(duì)3批中試產(chǎn)品進(jìn)行6個(gè)月的加速和常溫留樣考察。 結(jié)果：(1)性狀：本品為膠囊，內(nèi)容物為紅棕色至棕褐色顆粒，氣微，味微苦。(2)鑒別：成功地鑒別出黃芪、赤芍、墨旱蓮、三七、大黃及決明予。(3)檢查：三批中試產(chǎn)品的水分均低于5％、裝量差異在-3.6％～+4.2％之間、崩解時(shí)限低于20min、微生物各項(xiàng)指標(biāo)均符合規(guī)定，重金屬含量小于百萬(wàn)分之十、砷鹽含量小于百萬(wàn)分之二。(

5、4)含量測(cè)定：(一)芍藥苷的含量測(cè)定條件及結(jié)果：①芍藥苷的最大吸收波長(zhǎng)為230nm；②色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：色譜柱為waterssymmetryC18(250mm×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相為甲醇-水(28：72)；流速為1.0ml/min；芍藥苷色譜峰的理論塔板數(shù)大于4000，與相鄰色譜峰的分離度均大于2.0。③方法學(xué)考察結(jié)果：赤芍的陰性樣品沒(méi)有干擾；芍藥苷在進(jìn)樣量0.046～0.46μg間線性關(guān)系良好；穩(wěn)定性試驗(yàn)中對(duì)照品的RSD％為

6、0.78％，供試品的RSD％為1.5％；精密度試驗(yàn)中對(duì)照品的RSD％為0.31％，供試品的RSD％為1.8％；重復(fù)性試驗(yàn)的RSD％為0.22％，平均回收率為97.6％，RSD％為0.96％。④芍藥苷的限度：暫定本品每粒含赤芍以芍藥苷計(jì)不得低于1.7mg/粒。(二)黃芪甲苷的含量測(cè)定條件及結(jié)果：①黃芪甲苷的掃描波長(zhǎng)為525nm；②薄層色譜條件：硅膠G板，展開(kāi)劑為氯仿-甲醇-水-甲酸(10：4：0.5：0.1)；顯色劑為10％硫酸乙醇；顯色

7、條件為100℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；③方法學(xué)考查結(jié)果：黃芪陰性樣品沒(méi)有干擾；黃芪甲苷在點(diǎn)樣量0.464～2.784μg間線性關(guān)系良好；穩(wěn)定性試驗(yàn)對(duì)照品的供試品RSD％為2.3％，供試品的RSD％為1.7％；同板精密度試驗(yàn)中對(duì)照品的RSD％為1.7％，供試品的RSD％為1.4％；異板精密度試驗(yàn)中的RSD％為1.5％；重復(fù)性試驗(yàn)的RSD％為1.8％，平均回收率為97.5％，RSD％為0.94％。④含量限度：暫定本品每粒含黃芪以黃芪甲苷計(jì)不得低

8、于0.1mg/粒。 結(jié)論：描述了祛瘀退翳膠囊的性狀；多批樣品的水分、崩解時(shí)限、裝量差異檢查符合規(guī)定；成功地對(duì)赤芍、黃芪、墨旱蓮、三七、大黃和決明子進(jìn)行了薄層鑒別；對(duì)膠囊中的赤芍和黃芪分別進(jìn)行了含量控制。為祛瘀退翳膠囊提供了準(zhǔn)確、可靠的檢測(cè)方法。 第二部分祛瘀退翳膠囊穩(wěn)定性的研究 目的：通過(guò)對(duì)祛瘀退翳膠囊3批采用市售包裝的樣品6個(gè)月的穩(wěn)定性考察，初步確定藥品的有效期。 方法：根據(jù)祛瘀退翳膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和藥品制

9、劑穩(wěn)定性指導(dǎo)原則，分別在溫度40℃±2℃、相對(duì)濕度75％±5％和溫度25℃±2℃、相對(duì)濕度60％±10％的條件下放置，分別于0個(gè)月、1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月和6個(gè)月末取樣測(cè)定一次，按穩(wěn)定性重點(diǎn)考察項(xiàng)目檢測(cè)，對(duì)性狀、水分、崩解時(shí)限、鑒別、微生物限度及含量測(cè)定進(jìn)行檢查。 結(jié)果：3批祛瘀退翳膠囊采用市售包裝的樣品，在穩(wěn)定性考察的6個(gè)月期間，各項(xiàng)指標(biāo)均符合規(guī)定。重點(diǎn)考察項(xiàng)目，性狀的考察：內(nèi)容物均為紅棕色至棕褐色顆粒，氣微，味微苦，符合規(guī)定

10、；水分的檢查結(jié)果：水分均低于9.0％，符合規(guī)定；崩解時(shí)限的檢查結(jié)果：崩解時(shí)間均在30分鐘內(nèi)，符合規(guī)定：鑒別試驗(yàn)結(jié)果：均檢查出赤芍、黃芪、墨旱蓮、三七、大黃和決明子的特征性斑點(diǎn)，符合規(guī)定；微生物限度的檢查結(jié)果：細(xì)菌數(shù)均小于10000個(gè)/g，霉菌和酵母菌數(shù)均小于100個(gè)/g，大腸埃希菌和大腸菌群均未檢出，符合規(guī)定；含量測(cè)定結(jié)果：芍藥苷的含量均不少于1.7mg/粒，黃芪甲苷的含量均不少于0.1mg/粒，符合規(guī)定。 結(jié)論：經(jīng)過(guò)對(duì)祛瘀退翳