肝X受體激動(dòng)劑上調(diào)apoE基因敲除小鼠NPC1和NPC2的表達(dá).pdf

1、背景：NPC1是一個(gè)長(zhǎng)度為47Kb，定位在18號(hào)染色體長(zhǎng)臂11區(qū)且含有25個(gè)外顯子的基因，其編碼的蛋白質(zhì)是細(xì)胞晚期內(nèi)體中的一種跨膜糖蛋白；NPC2是一個(gè)定位在14號(hào)染色體長(zhǎng)臂24區(qū)3帶的基因，其編碼的蛋白質(zhì)是一種位于溶酶體中的膽固醇結(jié)合蛋白。NPC1和NPC2參與轉(zhuǎn)運(yùn)細(xì)胞內(nèi)的膽固醇到細(xì)胞膜。LXRα和LXRβ屬于核激素受體超家族成員中配體依賴的轉(zhuǎn)錄因子，它們能調(diào)節(jié)參與脂質(zhì)代謝的多種基因表達(dá)。最近的研究表明，LXR激動(dòng)劑可上調(diào)體外培養(yǎng)的巨

2、噬細(xì)胞NPC1和NPC2的表達(dá)，從而增加細(xì)胞內(nèi)游離膽固醇動(dòng)員到細(xì)胞膜，導(dǎo)致細(xì)胞膜外層富含膽固醇成分，進(jìn)而增加膽固醇流出。目前LXR激動(dòng)劑對(duì)機(jī)體內(nèi)的NPC1和NPC2表達(dá)是否存在影響尚未見報(bào)道。 目的： 研究一種合成的LXR激動(dòng)劑T0901317對(duì)apoE基因敲除小鼠NPC1和NPC2表達(dá)的影響，以便探討NPC1和NPC2在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展中的作用。 方法： 52只雄性apoE基因敲除小鼠被隨機(jī)分成四組

3、：a. 基礎(chǔ)組(n=10)；b. 對(duì)照組(n=14)；c. LXR激動(dòng)劑治療組(n=14)；d. LXR激動(dòng)劑預(yù)防組(n=14)。各組小鼠均被給予高脂/高膽固醇飼料喂養(yǎng)；基礎(chǔ)組小鼠被賦形劑灌胃處理8周；對(duì)照組小鼠被賦形劑灌胃處理14周；LXR激動(dòng)劑治療組小鼠在前8周被賦形劑灌胃處理，后6周被T0901317灌胃處理；LXR激動(dòng)劑預(yù)防組小鼠被T0901317灌胃處理14周。采用實(shí)時(shí)定量PCR、Western blot和免疫組織化學(xué)方法分別

4、檢測(cè)組織中NPC1和NPC2 mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)；采用酶法測(cè)定血清中血漿總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、載脂蛋白AⅠ(ApoA-Ⅰ)和載脂蛋白B(ApoB)含量；使用油紅O染色檢測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化病變及肝組織中脂肪蓄積情況；采用蘇丹Ⅳ染色檢測(cè)主動(dòng)脈的動(dòng)脈粥樣硬化病變情況。 結(jié)果： LXR激動(dòng)劑治療組和預(yù)防組小鼠的TC，TG，HDL-C和ApoAⅠ水平