LXR激動(dòng)劑T0901317抑制apoE---小鼠動(dòng)脈粥樣硬化且促進(jìn)ABCA1表達(dá).pdf

1、目的：肝X受體（LXRs）是核受體超家族的成員，它能誘導(dǎo)參與細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出、腸道膽固醇吸收以及肝臟脂質(zhì)合成基因的表達(dá)。由于LXR信號(hào)途徑對(duì)脂質(zhì)代謝的各個(gè)方面都有影響，所以很難對(duì)人工合成LXR激動(dòng)劑的體內(nèi)長(zhǎng)期作用進(jìn)行預(yù)測(cè)。本文觀察人工合成的LXR激動(dòng)劑T0901317對(duì)apoE基因敲除（apoE-/-）小鼠動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展及三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1（ABCA1）表達(dá)的影響, 并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行探討，以便明確LXR在防治動(dòng)脈粥樣硬化中的

2、作用。 方法：將52只雄性apoE-/-小鼠隨機(jī)分為四組，基礎(chǔ)組10只，其他三組均14只：基礎(chǔ)組8周末處死；對(duì)照組給予溶媒灌胃14周；預(yù)防組給予T0901317灌胃（10mg/kg/d）14周；治療組給予溶媒灌胃8周，自第9周開始給予T0901317灌胃（10mg/kg/d）；后三組都于14周末安樂(lè)死處。所有小鼠都給予高脂高膽固醇飼料（15％豬油＋0.25％膽固醇）飼養(yǎng)。蘇丹IV染色檢測(cè)主動(dòng)脈內(nèi)膜面動(dòng)脈粥樣硬化病變面積。采用冰凍

3、切片油紅O染色檢測(cè)apoE-/-小鼠主動(dòng)脈橫切面動(dòng)脈粥樣硬化斑塊面積。氧化酶法測(cè)定apoE-/-小鼠血漿甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）含量。免疫比濁法檢測(cè)血漿載脂蛋白A-I（apoA-I）、apoB含量。油紅O染色apoE-/-小鼠肝臟, 光鏡下觀察肝臟內(nèi)脂滴。半定量RT-PCR檢測(cè)apoE-/-小鼠肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的表達(dá)?；蛐酒瑱z測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)基因表達(dá)情

4、況。實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)apoE-/-小鼠主動(dòng)脈、肝臟、小腸及大腦ABCA1基因表達(dá)。免疫組織化學(xué)與Western印跡法檢測(cè)apoE-/-小鼠主動(dòng)脈、肝臟、小腸及大腦ABCA1蛋白質(zhì)表達(dá)。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示T0901317減輕主動(dòng)脈內(nèi)膜面和主動(dòng)脈橫截面的動(dòng)脈粥樣硬化病變；血脂檢測(cè)發(fā)現(xiàn)T0901317處理組apoE-/-小鼠血漿中的TG、TC、HDL–C、和apoA-I水平升高；光鏡下可見肝臟內(nèi)有染成紅色的脂質(zhì)滴，且T090131

5、7能增加肝臟內(nèi)脂質(zhì)的蓄積；半定量RT-PCR結(jié)果顯示T0901317上調(diào)肝臟LXRα、ABCA1、ABCG1及甾醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1-C（SREBP-1c）的基因表達(dá)；基因芯片檢測(cè)結(jié)果提示T0901317上調(diào)肝臟LXR靶基因如LXRα、ABCA1等基因表達(dá)，同時(shí)下調(diào)促炎基因如白介素-1α（IL-1α）、IL-6及IL-7的表達(dá)；進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR分析，結(jié)果顯示T0901317增加apoE-/-小鼠主動(dòng)脈、肝臟、小腸及大腦ABCA1基因表