超聲空化聯(lián)合凝血酶原消融犬前列腺的實驗研究.pdf

1、研究背景：
　　良性前列腺增生(Benign prostatic hyperplasia,BPH)在中老年男性中是一種常見病和多發(fā)病。目前治療BPH的金標準是經(jīng)尿道前列腺切除術(transurethral resection of prostate,TURP),此種方法雖然能夠有效的緩解BPH的有關癥狀,但仍存在著一定的手術并發(fā)癥。近年來針對BPH的微創(chuàng)治療技術發(fā)展迅速,但對BPH尿路梗阻癥狀的緩解均不如TURP,且仍有一定的并發(fā)

2、癥。因此,發(fā)展一種有效的BPH微創(chuàng)治療方法十分必要。
　　空化效應是超聲的熱效應之外另一主要的物理效應。近年來微泡誘導增強的空化效應成為一種前沿的治療新技術,應用于腫瘤血管毀損治療、溶解血栓、開放血腦屏障等領域。由于超聲造影劑微泡是一種有效的空化核,利用經(jīng)靜脈注射微泡聯(lián)合低強度脈沖式聚焦超聲的方法,可以造成兔血管內(nèi)皮嚴重的機械損傷,使用凝血酶原進而造成了血管內(nèi)血栓形成和血流阻斷。前期研究證實,大鼠的Walk-256腫瘤血管能被微泡

3、增強的超聲空化機械性破壞,造成腫瘤血供的暫時性阻斷。這可能是因為腫瘤新生血管自身結(jié)構有一定的發(fā)育缺陷,如血管基底膜不完整,缺乏彈力層等,因此更易被空化效應損傷。BPH主要發(fā)生在前列腺的內(nèi)腺區(qū),也表現(xiàn)出一定程度的血管新生。超聲造影顯示在BPH中前列腺內(nèi)腺的造影劑(空化核)充盈程度明顯高于外腺,對實施空化消融可能是一有利因素。因此,有必要探討微泡增強的超聲空化聯(lián)合人凝血酶原復合物對BPH的消融治療作用。
　　研究目的：
　　1.

4、探討微泡超聲空化聯(lián)合凝血酶原對犬前列腺血流灌注的影響及相關機制。
　　2.探討微泡超聲空化聯(lián)合凝血酶原對犬前列腺的消融能力及相關機制。
　　材料和方法：
　　1.實驗材料：
　?、貱Z-960型脈沖式超聲空化治療儀:脈沖式弱聚焦能量發(fā)射,治療頭頻率831kHz,儀器的峰值聲壓、脈沖重復頻率、脈沖寬度等均可調(diào)節(jié),本實驗中所采用的峰值聲壓為4.3MPa,占空比約為0.5％。
　?、谌四冈瓘秃衔?上海萊士血液

5、制品有限公司生產(chǎn)。
　?、鄢曉\斷儀:西門子公司ACUSONS2000彩色多普勒超聲診斷儀,采用9L4線陣探頭,頻率為4~9MHz,具有造影成像條件,安裝了contrastdynamic超聲造影分析軟件。
　?、芪⑴菰煊皠?“脂氟顯”脂質(zhì)微泡,科室自行研制,核心氣體為全氟丙烷,成膜材料為脂質(zhì),濃度約為4~9×109/ml,98%粒徑小于8μm,平均粒徑2μm。
　　⑤實驗動物:32只健康成年雄性雜種犬,犬齡2~4年,體

6、質(zhì)量8~14kg,第三軍醫(yī)大學動物實驗中心提供。
　　2.實驗方法：
　　第一部分:用3%戊巴比妥鈉將實驗犬麻醉后充分暴露前列腺,進行處理前的超聲造影檢查,接著在滴注人凝血酶原復合物后用超聲空化治療儀輻照前列腺,微泡增強的超聲空化聯(lián)合凝血酶原(Microbubble enhanced ultrasound with prothrombin,PMEUS)組在輻照的同時緩慢推注微泡造影劑;治療超聲聯(lián)合凝血酶原(Therapeut

7、ic ultrasound with prothrombin,PTUS)組在輻照的同時用10ml生理鹽水代替微泡;單純凝血酶原(Prothrombin)組則采用假照的方式,同時推注10ml生理鹽水。各組空化處理后即刻和處理后30min、60min再次對前列腺靶區(qū)進行超聲造影檢查。用儀器自帶軟件分析造影圖像。造影后每個實驗組中取3只動物處死后取前列腺標本供病理學檢查。
　　第二部分:12只成年雄性雜種犬隨機分為3組:PMEUS(n=

8、4)、PTUS(n=4)和Prothrombin(n=4)。各實驗組的處理方式同第一部分實驗。各組處理后分兩個時間點進行觀察,即處理后即刻(n=2)和處理后48小時(n=2)。處理后即刻組于空化處理后處死動物,取前列腺標本進行病理學觀察;處理后48小時組空化處理后關腹于48小時后行病理學觀察。
　　結(jié)果：
　　1.PMEUS組處理后即刻造影可見前列腺損傷靶區(qū)出現(xiàn)明顯的充盈缺損,之后可見損傷靶區(qū)造影劑逐漸的充填,但造影達峰值強

9、度時靶區(qū)增強強度仍低于實驗前;處理后30min和60min造影,損傷靶區(qū)造影劑的充盈程度均低于處理前。分析時間-強度曲線,處理后即刻造影峰值強度由處理前的36.21±5.58%下降至27.12±6.34%(P<0.05),處理后30min和60min造影峰值強度為26.27±8.19%(P<0.05)和28.91±4.28%(P<0.05);和實驗處理前相比,處理后曲線下面積雖有下降,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);處理后達峰時間和

10、平均渡越時間和處理前相比也無明顯差異。病理結(jié)果顯示作用靶區(qū)血管破裂、出血,血栓、血腫形成等。
　　PTUS組和Prothrombin組超聲造影顯示處理前后造影劑的充盈程度未見明顯差異,病理檢查均未發(fā)現(xiàn)異常。
　　2.處理后即刻PMEUS組光鏡下可見前列腺損傷靶區(qū)有大量紅細胞漏出,存在于間質(zhì)和腺腔內(nèi),血栓、血腫形成。PTUS組和Prothrombin組光鏡下未見異常改變。
　　3.實驗處理后48小時PMEUS組作用靶區(qū)前

11、列腺正常組織結(jié)構幾乎完全消失,代之以片狀的壞死區(qū),內(nèi)有條索狀的纖維組織分隔,壞死區(qū)及其周圍的前列腺間質(zhì)內(nèi)有大量的炎癥細胞浸潤。PTUS組和Prothrombin組實驗處理后48小時光鏡下可見正常前列腺組織,未見異常改變。
　　結(jié)論
　　1.微泡超聲空化聯(lián)合凝血酶原能夠毀損犬前列腺血管,產(chǎn)生一定程度的血流灌注阻斷作用。
　　2.微泡超聲空化聯(lián)合凝血酶原能夠毀損犬前列腺血管,導致前列腺組織的片狀壞死。上述損傷效應可能對BP