超聲空化聯(lián)合凝血酶原消融犬前列腺的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景：
　　良性前列腺增生(Benign prostatic hyperplasia,BPH)在中老年男性中是一種常見(jiàn)病和多發(fā)病。目前治療BPH的金標(biāo)準(zhǔn)是經(jīng)尿道前列腺切除術(shù)(transurethral resection of prostate,TURP),此種方法雖然能夠有效的緩解BPH的有關(guān)癥狀,但仍存在著一定的手術(shù)并發(fā)癥。近年來(lái)針對(duì)BPH的微創(chuàng)治療技術(shù)發(fā)展迅速,但對(duì)BPH尿路梗阻癥狀的緩解均不如TURP,且仍有一定的并發(fā)

2、癥。因此,發(fā)展一種有效的BPH微創(chuàng)治療方法十分必要。
　　空化效應(yīng)是超聲的熱效應(yīng)之外另一主要的物理效應(yīng)。近年來(lái)微泡誘導(dǎo)增強(qiáng)的空化效應(yīng)成為一種前沿的治療新技術(shù),應(yīng)用于腫瘤血管毀損治療、溶解血栓、開(kāi)放血腦屏障等領(lǐng)域。由于超聲造影劑微泡是一種有效的空化核,利用經(jīng)靜脈注射微泡聯(lián)合低強(qiáng)度脈沖式聚焦超聲的方法,可以造成兔血管內(nèi)皮嚴(yán)重的機(jī)械損傷,使用凝血酶原進(jìn)而造成了血管內(nèi)血栓形成和血流阻斷。前期研究證實(shí),大鼠的Walk-256腫瘤血管能被微泡

3、增強(qiáng)的超聲空化機(jī)械性破壞,造成腫瘤血供的暫時(shí)性阻斷。這可能是因?yàn)槟[瘤新生血管自身結(jié)構(gòu)有一定的發(fā)育缺陷,如血管基底膜不完整,缺乏彈力層等,因此更易被空化效應(yīng)損傷。BPH主要發(fā)生在前列腺的內(nèi)腺區(qū),也表現(xiàn)出一定程度的血管新生。超聲造影顯示在BPH中前列腺內(nèi)腺的造影劑(空化核)充盈程度明顯高于外腺,對(duì)實(shí)施空化消融可能是一有利因素。因此,有必要探討微泡增強(qiáng)的超聲空化聯(lián)合人凝血酶原復(fù)合物對(duì)BPH的消融治療作用。
　　研究目的：
　　1.

4、探討微泡超聲空化聯(lián)合凝血酶原對(duì)犬前列腺血流灌注的影響及相關(guān)機(jī)制。
　　2.探討微泡超聲空化聯(lián)合凝血酶原對(duì)犬前列腺的消融能力及相關(guān)機(jī)制。
　　材料和方法：
　　1.實(shí)驗(yàn)材料：
　　①CZ-960型脈沖式超聲空化治療儀:脈沖式弱聚焦能量發(fā)射,治療頭頻率831kHz,儀器的峰值聲壓、脈沖重復(fù)頻率、脈沖寬度等均可調(diào)節(jié),本實(shí)驗(yàn)中所采用的峰值聲壓為4.3MPa,占空比約為0.5％。
　?、谌四冈瓘?fù)合物:上海萊士血液

5、制品有限公司生產(chǎn)。
　　③超聲診斷儀:西門(mén)子公司ACUSONS2000彩色多普勒超聲診斷儀,采用9L4線陣探頭,頻率為4~9MHz,具有造影成像條件,安裝了contrastdynamic超聲造影分析軟件。
　　④微泡造影劑:“脂氟顯”脂質(zhì)微泡,科室自行研制,核心氣體為全氟丙烷,成膜材料為脂質(zhì),濃度約為4~9×109/ml,98%粒徑小于8μm,平均粒徑2μm。
　?、輰?shí)驗(yàn)動(dòng)物:32只健康成年雄性雜種犬,犬齡2~4年,體

6、質(zhì)量8~14kg,第三軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。
　　2.實(shí)驗(yàn)方法：
　　第一部分:用3%戊巴比妥鈉將實(shí)驗(yàn)犬麻醉后充分暴露前列腺,進(jìn)行處理前的超聲造影檢查,接著在滴注人凝血酶原復(fù)合物后用超聲空化治療儀輻照前列腺,微泡增強(qiáng)的超聲空化聯(lián)合凝血酶原(Microbubble enhanced ultrasound with prothrombin,PMEUS)組在輻照的同時(shí)緩慢推注微泡造影劑;治療超聲聯(lián)合凝血酶原(Therapeut

7、ic ultrasound with prothrombin,PTUS)組在輻照的同時(shí)用10ml生理鹽水代替微泡;單純凝血酶原(Prothrombin)組則采用假照的方式,同時(shí)推注10ml生理鹽水。各組空化處理后即刻和處理后30min、60min再次對(duì)前列腺靶區(qū)進(jìn)行超聲造影檢查。用儀器自帶軟件分析造影圖像。造影后每個(gè)實(shí)驗(yàn)組中取3只動(dòng)物處死后取前列腺標(biāo)本供病理學(xué)檢查。
　　第二部分:12只成年雄性雜種犬隨機(jī)分為3組:PMEUS(n=

8、4)、PTUS(n=4)和Prothrombin(n=4)。各實(shí)驗(yàn)組的處理方式同第一部分實(shí)驗(yàn)。各組處理后分兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行觀察,即處理后即刻(n=2)和處理后48小時(shí)(n=2)。處理后即刻組于空化處理后處死動(dòng)物,取前列腺標(biāo)本進(jìn)行病理學(xué)觀察;處理后48小時(shí)組空化處理后關(guān)腹于48小時(shí)后行病理學(xué)觀察。
　　結(jié)果：
　　1.PMEUS組處理后即刻造影可見(jiàn)前列腺損傷靶區(qū)出現(xiàn)明顯的充盈缺損,之后可見(jiàn)損傷靶區(qū)造影劑逐漸的充填,但造影達(dá)峰值強(qiáng)

9、度時(shí)靶區(qū)增強(qiáng)強(qiáng)度仍低于實(shí)驗(yàn)前;處理后30min和60min造影,損傷靶區(qū)造影劑的充盈程度均低于處理前。分析時(shí)間-強(qiáng)度曲線,處理后即刻造影峰值強(qiáng)度由處理前的36.21±5.58%下降至27.12±6.34%(P<0.05),處理后30min和60min造影峰值強(qiáng)度為26.27±8.19%(P<0.05)和28.91±4.28%(P<0.05);和實(shí)驗(yàn)處理前相比,處理后曲線下面積雖有下降,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);處理后達(dá)峰時(shí)間和

10、平均渡越時(shí)間和處理前相比也無(wú)明顯差異。病理結(jié)果顯示作用靶區(qū)血管破裂、出血,血栓、血腫形成等。
　　PTUS組和Prothrombin組超聲造影顯示處理前后造影劑的充盈程度未見(jiàn)明顯差異,病理檢查均未發(fā)現(xiàn)異常。
　　2.處理后即刻PMEUS組光鏡下可見(jiàn)前列腺損傷靶區(qū)有大量紅細(xì)胞漏出,存在于間質(zhì)和腺腔內(nèi),血栓、血腫形成。PTUS組和Prothrombin組光鏡下未見(jiàn)異常改變。
　　3.實(shí)驗(yàn)處理后48小時(shí)PMEUS組作用靶區(qū)前

11、列腺正常組織結(jié)構(gòu)幾乎完全消失,代之以片狀的壞死區(qū),內(nèi)有條索狀的纖維組織分隔,壞死區(qū)及其周?chē)那傲邢匍g質(zhì)內(nèi)有大量的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。PTUS組和Prothrombin組實(shí)驗(yàn)處理后48小時(shí)光鏡下可見(jiàn)正常前列腺組織,未見(jiàn)異常改變。
　　結(jié)論
　　1.微泡超聲空化聯(lián)合凝血酶原能夠毀損犬前列腺血管,產(chǎn)生一定程度的血流灌注阻斷作用。
　　2.微泡超聲空化聯(lián)合凝血酶原能夠毀損犬前列腺血管,導(dǎo)致前列腺組織的片狀壞死。上述損傷效應(yīng)可能對(duì)BP