小空間細(xì)顆粒馴養(yǎng)對(duì)青少年恒河猴視覺(jué)系統(tǒng)發(fā)育影響及機(jī)制的研究.pdf

1、近視眼是一種多病因的眼部疾病,它在人群中尤其是青少年中有著很高的發(fā)病率且呈逐年上升的趨勢(shì):是造成青少年低視力的主要因?yàn)?。就發(fā)病機(jī)制而言可簡(jiǎn)單將其分為兩大類:一類是發(fā)病率較低的病理性近視,具有明確的家族史和遺傳突變的基因定位以及發(fā)病年齡早、近視度數(shù)高等特點(diǎn),部分還伴有眼部發(fā)育的異常。另一類則是當(dāng)今社會(huì)最為關(guān)注的青少年單純性近視,其多發(fā)生于學(xué)齡期青少年兒童,沒(méi)有確切的基因定位和家族遺傳史,病因不明確,故在其發(fā)病機(jī)制方面始終存在多種假說(shuō)。自上

2、世紀(jì)80年代發(fā)現(xiàn)教育程度高的人群近視眼發(fā)病率遠(yuǎn)高于教程度低的人群以來(lái),環(huán)境因素在單純性近視發(fā)病機(jī)制中的影響就引起了人們的廣泛關(guān)注。因此近年來(lái)大量關(guān)于近視眼與生活環(huán)境、視近時(shí)間、視近強(qiáng)度、及戶內(nèi)戶外活動(dòng)時(shí)間比例相關(guān)性的研究工作和流行病學(xué)調(diào)查在廣泛開(kāi)展,但其結(jié)論卻不甚明確,很多問(wèn)題都有待進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究加以證實(shí)。此外現(xiàn)有的近視眼動(dòng)物模型多為單眼的離焦性或形覺(jué)剝奪性動(dòng)物模型,其雖可誘導(dǎo)眼軸的被動(dòng)加長(zhǎng),但其機(jī)制與青少年單純性近視發(fā)病機(jī)制完全不同

3、,缺乏環(huán)境因素對(duì)近視發(fā)病機(jī)制的直接證據(jù)及模擬人類近視發(fā)病過(guò)程的近視眼動(dòng)物模型。
　　 本研究選取與人類生長(zhǎng)發(fā)育階段極為相似的靈長(zhǎng)類動(dòng)物恒河猴為研究對(duì)象,采用小空間馴養(yǎng)強(qiáng)制性長(zhǎng)時(shí)間近距離注視的方法,全程模擬青少年單純性近視的發(fā)病過(guò)程,以其獲得青少年恒河猴的單純性近視眼動(dòng)物模型,為青少年單純性近視眼的發(fā)生機(jī)制提供良好的近視眼動(dòng)物模型。同時(shí)聯(lián)合PRK技術(shù),使部分恒河猴獲得一定的單眼或雙眼離焦量和屈光參差量,以觀察長(zhǎng)時(shí)間近距離注視對(duì)不同

4、屈光狀態(tài)下青少年恒河猴視覺(jué)系統(tǒng)發(fā)育的影響,并與單純性近視眼動(dòng)物模型進(jìn)行對(duì)比分析,以其更好地說(shuō)明青少年單純性近視的發(fā)生發(fā)展機(jī)制并對(duì)其防治進(jìn)行初步的研究。
　　 研究目的:
　　 采用小空間馴養(yǎng)強(qiáng)制性長(zhǎng)時(shí)間視近的方法盡力完全模擬人類單純性近視眼發(fā)病過(guò)程的行為學(xué)近視眼動(dòng)物模型；并觀察小空間馴養(yǎng)對(duì)不同屈光狀態(tài)下的青少年恒河猴視覺(jué)系統(tǒng)發(fā)育的影響。
　　 材料和方法:
　　 選健康青少年恒河猴16只,隨機(jī)分為五4組；

5、所有恒河猴均于15.20月齡時(shí)入組進(jìn)行初次檢測(cè)和數(shù)據(jù)收集,整個(gè)檢測(cè)周期為24個(gè)月。每組采用不同的處理方式:A組:小空間馴養(yǎng)+雙眼3.00D遠(yuǎn)視離焦；B組:單純小空間馴養(yǎng)；C組:常規(guī)飼養(yǎng)(空白對(duì)照組)；D組:小空間馴養(yǎng)+右眼3.00D遠(yuǎn)視離焦。所有恒河猴均采取12/12小時(shí)晝夜光照節(jié)律變化,其中除C組常規(guī)全天飼養(yǎng)于視覺(jué)開(kāi)放式普通猴籠內(nèi),其余各組每天8h飼養(yǎng)于大小固定、照明通風(fēng)條件良好的視覺(jué)封閉式特制猴籠內(nèi),食物處理成小顆粒狀需注意翻找才能

6、獲得,以訓(xùn)練其用眼注視細(xì)小物體。將A、D兩組,按照預(yù)先設(shè)定方案分別進(jìn)行手術(shù)處理以達(dá)到+3.00D的屈光值。定期檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo):C組作為對(duì)照組,定期進(jìn)行一次睫狀肌麻痹檢影和眼部A超測(cè)厚檢查；A、B、C、D組同步進(jìn)行檢測(cè),檢測(cè)周期為PRK術(shù)前1W,術(shù)后1W,術(shù)后2W,術(shù)后3月,術(shù)后6月,術(shù)后9月,術(shù)后12月,術(shù)后15月,術(shù)后18月和術(shù)后24月,檢測(cè)項(xiàng)目包括睫狀肌麻痹檢影,眼部A超測(cè)厚檢查,眼壓測(cè)量,角膜地形圖檢查,角膜曲率檢查,視網(wǎng)膜電圖(E

7、RG)檢查,視神經(jīng)纖維層厚度測(cè)量(OCT)等,最終采用SPSS13.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析,以動(dòng)態(tài)觀察各種不同干預(yù)條件下青少年恒河猴眼球生長(zhǎng)和屈光度變化的情況。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
　　 1.眼壓及PRK術(shù)后角膜上皮恢復(fù)情況:整個(gè)觀察周期內(nèi)全部恒河猴的眼壓測(cè)量值均顯示在10到15mmHg之間,且左右眼配對(duì)T檢驗(yàn)均無(wú)顯著性差異；所有PRK術(shù)的恒河猴于術(shù)后4天角膜上皮完全修復(fù),角膜組織完全恢復(fù)透明,沒(méi)有出現(xiàn)明顯的不良反應(yīng)和角

8、膜混濁現(xiàn)象。
　　 2.屈光狀態(tài)、玻璃體腔長(zhǎng)度及角膜曲率變化情況:根據(jù)分組處理情況:先將A、B、C組進(jìn)行組間對(duì)照分析。A、B、C三組的恒河猴的處理過(guò)程均保持其個(gè)體雙眼無(wú)明顯屈光參差表現(xiàn)；因此三組間進(jìn)行比較可避免屈光參差等因素所導(dǎo)致的干擾,其中B組和C組之間的比較僅體現(xiàn)小空間馴養(yǎng)對(duì)恒河猴視覺(jué)系統(tǒng)發(fā)育的影響,A組和B組的比較則顯示不同屈光狀態(tài)下小空間馴養(yǎng)對(duì)眼球發(fā)育的影響。結(jié)果顯示:在觀察周期內(nèi)C組在開(kāi)放性空間飼養(yǎng)過(guò)程中的玻璃體腔長(zhǎng)度

9、沒(méi)有明顯增長(zhǎng)；A、B組在封閉式小空間馴養(yǎng)每天8h強(qiáng)制性近距離注視訓(xùn)練,兩組玻璃體長(zhǎng)度都有顯著性增長(zhǎng)；其中以A組增長(zhǎng)最為顯著。將各組問(wèn)玻璃體腔生長(zhǎng)速率兩兩比較顯示小空間馴養(yǎng)各組的玻璃體腔生長(zhǎng)速率均明顯快于常規(guī)飼養(yǎng)組,重復(fù)測(cè)量方差分析顯示其有顯著性差異；其中以小空間馴養(yǎng)+雙眼3.00遠(yuǎn)視離焦的A組生長(zhǎng)速率最快,明顯快于B、C組；D組(小空間馴養(yǎng)+右眼3.00D遠(yuǎn)視離焦)進(jìn)行組內(nèi)左右眼配對(duì)T檢驗(yàn)顯示兩組左右眼間玻璃體腔生長(zhǎng)速率有顯著性差異。<

10、br>　　 角膜曲率變化情況顯示B、C組角膜曲率值穩(wěn)定性良好,A、D各組在PRK術(shù)后有相應(yīng)的變化過(guò)程,但都在3個(gè)月內(nèi)趨于穩(wěn)定,與對(duì)側(cè)眼呈同步變化趨勢(shì)。
　　 3.ERG檢測(cè)結(jié)果:恒河猴各時(shí)期的視網(wǎng)膜電反應(yīng)潛伏期均與人類相似,在24個(gè)月的觀察周期內(nèi)各組左右眼間的電生理反應(yīng)一致性均良好,隨時(shí)間推移沒(méi)有因玻璃體和眼軸的加長(zhǎng)出現(xiàn)明顯的減弱或增強(qiáng)；與正常人類相比,其暗適應(yīng)狀態(tài)下25db弱光刺激下的暗視視桿細(xì)胞反應(yīng)及0db強(qiáng)光刺激下的混合

11、最大反應(yīng)中b波波幅均明顯小于正常人類,而在明視視錐細(xì)胞反應(yīng)中二者間則無(wú)明顯差異;由此提示我們恒河猴視網(wǎng)膜電反應(yīng)與人類有極大的相似性,但在暗適應(yīng)狀態(tài)下的電反應(yīng)值弱于正常人類。
　　 4.視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層厚度檢測(cè)結(jié)果:恒河猴各象限的神經(jīng)纖維厚度分布與正常人類相似,在上方和下方神經(jīng)纖維層較厚,顳側(cè)和鼻側(cè)象限偏薄,以鼻側(cè)為最??；各象限值與正常人類比較顯示上方和顥側(cè)象限較正常人類為薄,下方和鼻側(cè)象限則無(wú)顯著性差異。同時(shí)在24個(gè)月的觀察周期

12、內(nèi)各組左右眼間的視神經(jīng)纖維層厚度一致性良好,隨時(shí)間推移亦沒(méi)有因玻璃體和眼軸的加長(zhǎng)出現(xiàn)明顯的變薄。
　　 結(jié)論:
　　 1.長(zhǎng)時(shí)間近距離注視可以使雙眼玻璃體腔的生長(zhǎng)加速,且一定程度的雙眼遠(yuǎn)視性離焦與其有協(xié)同作用
　　 2.小空間細(xì)顆粒馴養(yǎng)(強(qiáng)制性長(zhǎng)時(shí)間近距離注視)是一種潛在的自然近視眼動(dòng)物模型的建立方法
　　 3.健康青少年恒河猴與正常人類的視覺(jué)系統(tǒng)極為相似,且左右眼發(fā)育同步性良好,是研究近視眼發(fā)病機(jī)制的最