嵌合抗CD20抗體突變體的表達及其作用機理的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該文主要目的是研究一突變的抗CD20抗體克降,研究抗CD20抗體的體外生物學活性以及為了增加抗體殺傷腫瘤的效率,構建可以在真核細胞CHO中表達的完整嵌合抗CD20抗體分子.該文利用噬菌體顯示技術成功地從HI47雜交瘤細胞中克隆單克隆抗CD20抗體HI47的輕重鏈可變區(qū)基因,構建成抗CD20單鏈抗體的表達載體pCANTAB 5E CD20ScFv,發(fā)現有克隆(-7)的輕鏈26位氨基酸為Asn,而其它克隆(-2)輕鏈26位氨基酸均為Ser.

2、利用基因工程的方法,將兩種克隆分別構建成嵌合抗CD20抗體Fab'片段(CD20-7和CD20-2),并在大腸桿菌16c9中表達.從抗CD20單鏈抗體表達載體pCANTAB 5E CD20ScFv上擴增抗CD20抗體輕、重鏈可變區(qū)基因VL和VH,將VL、VH基因通過分別含有人IgG1 CL和CH1的中間載體sspB11和sspB12,構建成抗CD<'20>嵌合抗體片Fab'表達載體pYZFcd20.CD20-7的產量和活性均高于CD20

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