表阿霉素與白藜蘆醇聯(lián)合用藥對多種人類腫瘤細胞的作用.pdf

1、惡性腫瘤的治療是一個世界性的難題，聯(lián)合用藥是提高腫瘤治療效果的途徑之一。本文研究了表阿霉素與白藜蘆醇聯(lián)合用藥在體外對提高腫瘤細胞抑制率的影響。白藜蘆醇是一種主要存在于葡萄中的天然分子，具有多種生物學效應，如抗腫瘤、抗氧化、抗突變、抗炎癥以及降低血糖等。它對腫瘤的發(fā)生、促進和發(fā)展三個階段都有明顯的抑制作用。表阿霉素是多種癌癥的臨床一線用藥，它是一種細胞周期非特異性的藥物，其主要作用部位是細胞核。表阿霉素能迅速透入到體外培養(yǎng)的細胞胞內，進入

2、細胞核與DNA結合，從而抑制核酸的合成和有絲分裂。目前關于表阿霉素與白藜蘆醇聯(lián)合用藥作用的研究極少，缺乏針對多種常見腫瘤的相關研究。為評價表阿霉素與白藜蘆醇聯(lián)合用藥對多種腫瘤細胞協(xié)同抑制作用，本文以人膠質瘤細胞系A172和T98G、人肺癌細胞系H838、人宮頸癌細胞系Hela、人肝癌細胞系HepG2、人乳腺癌細胞系MCF7、人胃癌細胞系MGC803和人正常肝細胞系L02為對象，研究了表阿霉素與白藜蘆醇單獨及聯(lián)合用藥對上述細胞系的抑制作用

3、。通過顯微鏡觀察單獨及聯(lián)合用藥處理后MCF7和MGC803細胞形態(tài)的改變，流式分析細胞周期分布，初步探討了表阿霉素與白藜蘆醇聯(lián)合用藥的作用機制。
　　 為研究單獨及聯(lián)合用藥對細胞的抑制情況，本文實驗以上述8種腫瘤細胞系為實驗對象，采用濃度依次為25uM、50uM、100uM、200uM和400uM的白藜蘆醇與濃度依次為0.1uM、1uM、5uM、10uM和20uM的表阿霉素單獨給藥，分別得到兩種藥物單獨給藥時對8種細胞系抑制作用

4、的劑量反應曲線。其次，用濃度為1uM的表阿霉素與濃度分別為25uM、50uM和100uM的白藜蘆醇聯(lián)合用藥，MTS法檢測藥物處理對細胞增殖的抑制，觀察聯(lián)合用藥的增效作用。細胞形態(tài)變化可通過光學顯微鏡進行觀察；碘化丙啶(Propidium iodide，PI)單染法可以通過熒光顯微鏡直接觀察到發(fā)生凋亡或壞死細胞。由于表阿霉素與白藜蘆醇都與細胞周期抑制有關，本實驗同時采用流式細胞術檢測細胞周期分布變化，評估單獨及聯(lián)合用藥后細胞周期的變化。<

5、br>　　 實驗結果表明不同劑量的表阿霉素與白藜蘆醇單獨給藥時，對上述各種細胞系均有抑制作用，在本實驗所用劑量范圍內，抑制率與濃度成正相關效應。聯(lián)合用藥對MCF7和MGC803細胞協(xié)同抑制效果明顯，1uM的表阿霉素單獨給藥對MCF7細胞的抑制率為33％，25uM的白藜蘆醇單獨給藥對MCF7細胞的抑制率為7%，而聯(lián)合用藥對MCF7細胞的抑制率為63%，遠高于單獨給藥抑制率的加和(P＜0.01)。在MGC803細胞系中也觀察到了類似的協(xié)同

6、抑制效果。進一步選取MCF7和MGC803細胞系進行了形態(tài)觀察和細胞周期實驗：光學和熒光顯微鏡觀察對照組和白藜蘆醇處理組細胞形態(tài)基本正常，白藜蘆醇處理組細胞出現(xiàn)輕微凋亡，而表阿霉素處理組和聯(lián)合用藥組細胞形態(tài)異常，并出現(xiàn)大量凋亡及壞死細胞。流式結果顯示白藜蘆醇主要將細胞抑制在S期，而表阿霉素對細胞各周期都有抑制作用，主要將細胞抑制在G2/M期，聯(lián)合用藥組細胞出現(xiàn)大量凋亡或壞死，處于正常生命周期中的細胞比例減少。
　　 本課題在體外