香煙煙霧提取物聯(lián)合UVB照射對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞端粒長(zhǎng)度和端粒酶活性的影響.pdf

1、目的:通過(guò)觀察香煙煙霧提取物(cigarette smoke extract, CSE)聯(lián)合UVB照射對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞端粒長(zhǎng)度和端粒酶活性的影響，進(jìn)一步探討在吸煙過(guò)程中產(chǎn)生的煙霧及紫外線照射在促使皮膚發(fā)生老化的作用。
　　方法:采用細(xì)胞舊液與細(xì)胞新液按1∶2比例的方法培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞并繪制生長(zhǎng)曲線;MTT法檢測(cè)CSE對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞增殖的影響;用三種不同濃度的CSE和UVB照射（30mJ/cm2）處理人皮膚成纖維細(xì)胞后采用

2、實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(RT-PCR)檢測(cè)端粒長(zhǎng)度的變化，同時(shí)采用聚合酶鏈反應(yīng)-酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(PCR-ELISA)方法檢測(cè)端粒酶活性的變化情況。
　　結(jié)果:采用細(xì)胞舊液與細(xì)胞新液按1∶2比例的方法培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞與常規(guī)培養(yǎng)方法相比較，其倍增時(shí)間相對(duì)較短，其潛伏期為0-1d，生長(zhǎng)期為2-4d，第4d之后細(xì)胞增殖緩慢，進(jìn)入一個(gè)比較穩(wěn)定的平臺(tái)期;常規(guī)培養(yǎng)細(xì)胞的方法:潛伏期為0-2d，生長(zhǎng)增殖期為2-5d，第5d之后則進(jìn)入穩(wěn)定的

3、平臺(tái)期;CSE對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞的增殖在低濃度（＜37.5μL/mL)時(shí)具有促進(jìn)作用，在高濃度(＞75μL/mL)時(shí)具有抑制作用，但與未加CSE組相比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05); UVB照射組和CSE聯(lián)合UVB照射處理組人皮膚成纖維細(xì)胞的端粒長(zhǎng)度與端粒酶活性的變化情況與未處理組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，且隨著CSE濃度的增加，端粒長(zhǎng)度與端粒酶活性的變化情況越明顯。
　　結(jié)論:采用按細(xì)胞舊液與細(xì)胞新液比例為1∶