雌激素受體和視黃酸受體對(duì)促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素的調(diào)控.pdf

1、在抑郁癥發(fā)病過程中，下丘腦-垂體-腎上腺軸的過度驅(qū)動(dòng)和下丘腦室旁核(PVN)的促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(corticotropin-releasing hormone，CRH)神經(jīng)元的活性上調(diào)是抑郁癥的重要特征。多種類固醇/甲狀腺受體家族的成員參與了CRH基因的表達(dá)調(diào)控，例如糖皮質(zhì)激素受體，雌激素受體和雄激素受體等。我們主要研究了雌激素受體和視黃酸受體對(duì)CRH基因的調(diào)控。
　　 1.雌激素受體對(duì)促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素的調(diào)控及其

2、分子機(jī)制
　　 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(corticotropin-releasing hormone，CRH)在控制應(yīng)激反應(yīng)中起著重要的作用。我們的目標(biāo)是確定雌激素受體對(duì)CRt基因的調(diào)控作用并對(duì)其內(nèi)在機(jī)制進(jìn)行分析。我們?cè)谌松窠?jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系BE(2)C中，研究了雌激素受體(estrogen receptor，ER)對(duì)其內(nèi)源性CRHmRNA表達(dá)的調(diào)控。定量反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)顯示，在雌激素存在的情況下，在BE(2)C細(xì)胞中過

3、表達(dá)ERα或ERβ能使CRH的轉(zhuǎn)錄增加。染色質(zhì)免疫共沉淀分析顯示在雌激素的處理下ERα和ERβ都能與CRH啟動(dòng)子相結(jié)合。但是電泳遷移率分析表明兩個(gè)CRH啟動(dòng)子區(qū)的半雌激素反應(yīng)元件(estrogen response element，ERE)并不能與ERs結(jié)合。為了闡明調(diào)控機(jī)制，我們采用了點(diǎn)突變實(shí)驗(yàn)和在CHO細(xì)胞系中的報(bào)告基因分析。我們發(fā)現(xiàn)當(dāng)CRH啟動(dòng)子區(qū)的半雌激素反應(yīng)元件和cAMP反應(yīng)元件(CRE)突變后，ER介導(dǎo)的CRH啟動(dòng)子的激活也

4、被降低。而且在兩個(gè)半雌激素反應(yīng)元件中，在-316位點(diǎn)的反應(yīng)元件對(duì)ER誘導(dǎo)的CRH組成性的表達(dá)更有意義?？傊?，我們的結(jié)果確定了ERα和ERβ能夠激活CRH基因的表達(dá)，證明了半雌激素反應(yīng)元件和CRE在此激活作用中的重要性。
　　 2.視黃酸受體通過對(duì)促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素神經(jīng)元的調(diào)控參與抑郁癥的發(fā)病
　　 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)被認(rèn)為是應(yīng)激反應(yīng)的中樞驅(qū)動(dòng)力并在抑郁癥發(fā)病過程中起著關(guān)鍵作用。臨床研究提示視黃酸(r

5、etinoic acid，RA)與抑郁癥有關(guān)。我們首先對(duì)12例抑郁癥患者和與之匹配的12例對(duì)照的下丘腦組織進(jìn)行免疫熒光雙標(biāo)來分析其CRH和視黃酸受體α(retinoic acid receptor，RARα)的表達(dá)。然后在大鼠抑郁癥模型中觀察了RA信號(hào)通路中關(guān)鍵基因的表達(dá)。最后用體外實(shí)驗(yàn)研究了RARα對(duì)CRH基因表達(dá)的調(diào)控。我們發(fā)現(xiàn)RARα的表達(dá)與人下丘腦室旁核(PVN)CRH神經(jīng)元共存。在抑郁癥病人中，RARα免疫陽性和CRH-RAR