葡萄糖濃度波動(dòng)對(duì)小鼠肝臟及人肝L02細(xì)胞影響的初步研究.pdf

1、隨著人民生活水平的提高，糖尿病已成為一種常見(jiàn)病、多發(fā)病，其引起的死亡人數(shù)僅位列心腦血管病與癌癥之后，已引起各國(guó)高度重視，紛紛對(duì)其發(fā)病機(jī)制、藥物防治投入巨資進(jìn)行研究。高血糖是糖尿病的標(biāo)志以及導(dǎo)致慢性并發(fā)癥的主要原因。臨床研究顯示，長(zhǎng)期的血糖波動(dòng)比慢性持續(xù)高血糖對(duì)于人體的危害更加嚴(yán)重。糖尿病人的預(yù)后及心血管、腎臟和視網(wǎng)膜病變等糖尿病慢性并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展不僅與整體血糖水平的升高密切相關(guān)，而且與血糖波動(dòng)性也有密切關(guān)系。肝臟在人體消化、吸收、排

2、泄、生物轉(zhuǎn)化以及各類物質(zhì)代謝特別是糖代謝中起代謝中樞的作用，在糖尿病的發(fā)生發(fā)展中起著非常重要的作用，而血糖波動(dòng)對(duì)小鼠肝臟以及人肝細(xì)胞影響的研究未見(jiàn)報(bào)道。因此本文從動(dòng)物模型和離體細(xì)胞模型兩個(gè)層面來(lái)研究血糖波動(dòng)對(duì)肝臟的損傷作用，旨在為進(jìn)一步探討糖尿病及其并發(fā)癥的發(fā)病機(jī)理提供一些實(shí)驗(yàn)依據(jù)，對(duì)臨床控制血糖的措施提供理論指導(dǎo)。 動(dòng)物水平：以四氧嘧啶(alloxan)誘導(dǎo)糖尿病模型小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，用腹腔注射葡萄糖的方法建立糖尿病小鼠血糖波動(dòng)

3、模型來(lái)觀察血糖波動(dòng)和持續(xù)性高血糖對(duì)小鼠肝臟的不同損傷情況。實(shí)驗(yàn)分為三組：正常組(N)、糖尿病模型組(M)和糖尿病模型+波動(dòng)組(M+F)，四周后摘眼球取血處死小鼠，分別測(cè)定小鼠的血糖、血清轉(zhuǎn)氨酶活力、血清果糖胺含量，血清胰島素含量；肝臟勻漿中的糖原、谷胱甘肽(GSH)、過(guò)氧化氫酶(CAT)，丙二醛(MDA)和糖基化終產(chǎn)物(AGEs)等。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)糖尿病小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶活力升高，血清胰島素含量提高，胰島素敏感指數(shù)下降，AGEs含量提高，肝糖

4、原減少，GSH、CAT的含量下降，表明肝臟糖代謝、能量代謝出現(xiàn)紊亂，抗氧化能力的下降并且伴隨胰島素抵抗，而血糖波動(dòng)組小鼠與糖尿病組小鼠相比對(duì)肝臟損傷更為嚴(yán)重。 細(xì)胞水平：以人肝L02細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，以葡萄糖濃度波動(dòng)和持續(xù)高糖及相關(guān)對(duì)照組分別處理細(xì)胞，來(lái)觀察葡萄糖濃度波動(dòng)和持續(xù)高糖對(duì)人肝L02細(xì)胞的不同影響。將人肝L02細(xì)胞分成5組：正常對(duì)照組(N)、高糖損傷組(H)、葡萄糖濃度波動(dòng)組(F)、總糖負(fù)載相同對(duì)照組(L)和滲透壓波動(dòng)對(duì)

5、照組(P)。處理72h后分別測(cè)定培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)氨酶活力，細(xì)胞中糖原含量，MDA，GSH含量，ATP酶活力，葡萄糖激酶活性，游離鈣離子和細(xì)胞膜流動(dòng)性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)葡萄糖濃度波動(dòng)和高糖的條件下培養(yǎng)基中的轉(zhuǎn)氨酶活力明顯上升，胞內(nèi)游離鈣離子含量顯著上升，細(xì)胞膜流動(dòng)性降低，葡萄糖激酶活性降低，且葡萄糖濃度波動(dòng)組比持續(xù)高糖組對(duì)人肝L02細(xì)胞造成的損害總體上比較嚴(yán)重。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明血糖波動(dòng)對(duì)糖尿病小鼠肝臟和人肝L02細(xì)胞造成的損害均比持續(xù)的高糖濃度造成的損