葡萄糖濃度對大鼠胰腺導管干細胞誘導分化的影響.pdf

1、背景：葡萄糖是胰腺導管干細胞分化的重要因素之一，與分化后胰島素分泌細胞數(shù)量及分泌能力相關。
　　 目的：對比不同濃度葡萄糖誘導下，胰腺導管干細胞分化后細胞的胰島素分泌能力，以確定理想的葡萄糖誘導胰腺導管干細胞分化的濃度范圍，制定標準化實驗方案。
　　 設計：隨機對照觀察。
　　 單位：青島市市立醫(yī)院細胞及肝膽胰實驗室材料：胰腺導管干細胞取自Wistar大鼠，實驗過程中對動物的處置符合動物倫理學標準。
　　

2、 方法：使用膠原酶V消化動物實驗所得到的胰腺組織，將葡聚糖Ficoll-400配成濃度梯度，分離及純化胰腺上皮細胞，從而獲取胰腺導管干細胞。獲取的干細胞隨機分為10組。每一組均體外培養(yǎng)，經(jīng)過增殖及分化形成胰島素分泌細胞。分化階段時各組均在含有10mM尼克酰胺及不同濃度葡萄糖的培養(yǎng)基中進行，各組葡萄糖濃度分別為5.6mM、10.6mM、15.6 mM、20.6mM、25.6mM、30.6mM、35.6mM、45.6mM、55.6mM及10

3、5.6mM。使用免疫熒光染色法鑒定胰腺導管干細胞。使用光化學發(fā)光法檢測分化出的胰島素分泌細胞的胰島素分泌量。
　　 結(jié)果：葡萄糖濃度為20.6mM、25.6mM、30.6mM組的刺激指數(shù)高于其他組(P<0.05)，但這三組兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。葡萄糖濃度為15.6mM、20.6mM、25.6mM組的胰島素分泌量高于其他組(P<0.05)，但這三組兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　 結(jié)論：