3-氫化松苓酸B的降糖機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　研究3-氫化松苓酸B的降糖活性,進(jìn)一步研究其降糖機(jī)制,為3-氫化松苓酸B應(yīng)用于糖尿病的治療提供理論基礎(chǔ)。
　　方法:
　　(1)雄性昆明小鼠高糖高脂飼料飼養(yǎng)8周后,腹腔注射四氧嘧啶建立2型糖尿病小鼠。給予3-氫化松苓酸B后,檢測小鼠血糖、胰島素和胰島素敏感性指數(shù)。
　　(2)采用計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì),以B.cereus oligo-1,6-glucosidase為模板構(gòu)建α-葡萄糖苷酶同源模型,然后將3

2、-氫化松苓酸B與α-葡萄糖苷酶模型進(jìn)行分子對接,對接復(fù)合物再執(zhí)行1000ps分子動(dòng)力學(xué)計(jì)算。
　　(3)采用酵母來源的α-葡萄糖苷酶,以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷為底物,測試3-氫化松苓酸B的α-葡萄糖苷酶抑制活性。
　　(4)采用大鼠小腸來源的麥芽糖酶,以麥芽糖為底物,測試3-氫化松苓酸B的麥芽糖酶抑制活性。
　　(5)采用大鼠小腸來源的蔗糖酶,以蔗糖為底物,測試3-氫化松苓酸 B的蔗糖酶抑制活性。
　　

3、(6)雄性昆明小鼠高糖高脂飼料飼養(yǎng)8周后,腹腔注射四氧嘧啶建立Ⅱ型糖尿病小鼠。給予3-氫化松苓酸 B處理4周后,檢測小鼠血糖、胰島素和胰島素敏感性指數(shù);測定肝、肌糖原含量;采用酶聯(lián)免疫試劑盒測定小鼠血清 TNF-α、IL-6和CRP含量,小鼠胰腺組織中TNF-α和IL-6含量,腎臟組織中TNF-α和IL-6含量。
　　結(jié)果:
　　(1)與糖尿病小鼠比較,3-氫化松苓酸B高、低劑量組均能夠降低糖尿病小鼠血糖(P<0.01),其

4、高劑量組能提高胰島素敏感性(P<0.05)。
　　(2)通過計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)分子對接計(jì)算得,3-氫化松苓酸B與α-葡萄糖苷酶模型對接相互作用能為–16.31 kcal/mol,3-氫化松苓酸B與 Asp214有氫鍵作用(距離2.00(A)),與Tyr71,Phe157,Phe158,Thr215,Phe300和Val303之間有疏水場作用。
　　(3)通過酵母α-葡萄糖苷酶的抑制試驗(yàn),3-氫化松苓酸B在20μg/ml、50

5、μg/ml、100μg/ml濃度下對α-葡萄糖苷酶的抑制率分別為66％、73.3％、80.5％。
　　(4)通過大鼠小腸麥芽糖酶抑制試驗(yàn),3-氫化松苓酸在20μg/ml、50μg/ml、(和)100μg/ml濃度下的OD值與對照組比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　(5)通過大鼠小腸蔗糖酶抑制試驗(yàn),3-氫化松苓酸在20μg/ml、50μg/ml、100μg/ml濃度下的OD值與對照組比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

6、
　　(6)與糖尿病小鼠比較,3-氫化松苓酸B高、中、低劑量組均能夠降低糖尿病小鼠血糖(P<0.01或 P<0.05),高劑量組能夠減少胰島素的分泌(P<0.05),高、中劑量組能提高胰島素敏感性(P<0.05);3-氫化松苓酸 B高、中、低劑量組能夠提高糖尿病小鼠的肝糖原含量(P<0.01或 P<0.05);3-氫化松苓酸B高、中劑量組小鼠血清 TNF-α含量有下降(P<0.01或 P<0.05),高、中、低劑量組小鼠血清IL-

7、6含量降低(P<0.01),高、中劑量組小鼠血清CRP含量降低(P<0.01或 P<0.05);高、中劑量組小鼠胰腺組織中TNF-α含量降低( P<0.01),高、中劑量組小鼠胰腺組織中IL-6含量降低(P<0.01或 P<0.05);3-氫化松苓酸B高劑量組小鼠腎臟組織中TNF-α含量有降低(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　3-氫化松苓酸B具有降糖作用,但不是通過抑制α-葡萄糖苷酶活性實(shí)現(xiàn)?？赡艿慕堤菣C(jī)制是:通過抑制炎癥