不同類型脂肪酸對3T3-L1脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素及其受體表達(dá)的影響.pdf

1、目的：通過觀察不同類型脂肪酸對3T3-L1脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素(adiponectin)及其受體(AdipoR1，AdipoR2)表達(dá)的影響，進(jìn)一步闡明脂聯(lián)素及其受體在胰島素抵抗中發(fā)揮的作用。方法：以鼠3T3-L1前脂肪細(xì)胞系(中國科學(xué)院生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所惠贈(zèng))為研究對象。3T3-L1細(xì)胞按照常規(guī)的貼壁細(xì)胞培養(yǎng)法培養(yǎng)。在細(xì)胞狀態(tài)良好時(shí)，傳代分瓶(1×105/ml，細(xì)胞接觸抑制2d后加入含10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液(含0.5mmol

2、/L 3-異丁基-1甲基黃嘌呤，10 μ g/ml胰島素，0.25 μ mol/L地塞米松)培養(yǎng)2d，接著換成10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液(含10 μ g/ml胰島素)培養(yǎng)2d，最后改為10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液，每2d換液，直至90％的細(xì)胞為成熟的脂肪細(xì)胞。將誘導(dǎo)成熟3T3-L1脂肪細(xì)胞分別經(jīng)不同濃度的棕櫚酸(PA)和二十二碳六烯酸(DHA)干預(yù)后檢測其脂聯(lián)素及其受體表達(dá)水平的改變，以β-actin為內(nèi)參照，半定量法RT-PCR

3、測定脂聯(lián)素及其受體mRNA的表達(dá)。結(jié)果：與對照組相比，經(jīng)PA干預(yù)后3T3-L1脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素表達(dá)減少，當(dāng)PA的濃度加至200 μ mol/L以上時(shí)，脂聯(lián)素表達(dá)的下降具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；經(jīng)DHA干預(yù)后3T3-L1脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素表達(dá)增加，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。經(jīng)PA干預(yù)后3T3-L1脂肪細(xì)胞R1，R2表達(dá)減少，各組細(xì)胞表達(dá)量間差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)：經(jīng)DHA干預(yù)后各組細(xì)胞R1，R2表達(dá)量間差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(