MMP-2、MMP-9基因啟動(dòng)子區(qū)單核苷酸多態(tài)性與宮頸癌相關(guān)性研究.pdf

1、目的：宮頸癌是常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤，近年來(lái)宮頸癌發(fā)病有增高趨勢(shì)，發(fā)病也趨于年輕化。基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）在促進(jìn)腫瘤增生、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移、血管生成方面都有重要作用。本研究采用病例對(duì)照研究方法，擬探討MMP-2、MMP-9基因啟動(dòng)子區(qū)單核苷酸多態(tài)性（single nucleotidepolymorphisms，SNPs）與宮頸癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的關(guān)系，并揭示MMP-2、MMP-9基因啟動(dòng)子

2、區(qū)單核苷酸多態(tài)性對(duì)各自mRNA表達(dá)水平的影響，進(jìn)一步闡明宮頸癌易感性及浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制，為宮頸癌的早期診斷、判斷預(yù)后及臨床治療提供分子生物學(xué)的指標(biāo)。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)對(duì)象來(lái)源于天津中心婦產(chǎn)科醫(yī)院2008年1月-2009年10月手術(shù)標(biāo)本，分為病例組和對(duì)照組兩組。提取病例組及對(duì)照組宮頸組織DNA，應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)（polymerase chain reaction-fragment lengthpolymor

3、phism，PCR-RFLP）分析技術(shù)，分別檢測(cè)MMP-2-735 C/T、MMP-9-1562C/T兩個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)的基因型；提取病例組及對(duì)照組宮頸組織總RNA，以逆轉(zhuǎn)后的cDNA為模板，通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)MMP-2，MMP-9基因mRNA表達(dá)進(jìn)行相對(duì)定量，以發(fā)現(xiàn)MMP-2、MMP-9基因啟動(dòng)子區(qū)SNPs對(duì)其mRNA表達(dá)水平的影響。數(shù)據(jù)分析采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理：病例組和對(duì)照組基因型頻率分布做Hardy-We

4、inberg平衡分析；基因型和等位基因頻率分布比較采用卡方檢驗(yàn)，以非條件logistic回歸方法計(jì)算表示相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)度的比值比（odds ratio，OR）及其95％可信區(qū)間（confidence interval，CI）；采用效應(yīng)修飾模型分析MMP-2和MMP-9基因之間的交互作用。P<0.05作為差異有顯著性的標(biāo)準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 1 MMP-2-735C/T多態(tài)性位點(diǎn)的CC、CT兩種基因型頻率在病例組和對(duì)照組中分

5、別是77.5％、22.5％和68.0％、32.0％，TT基因型沒(méi)有檢測(cè)到。兩組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；MMP-9-1562C/T多態(tài)性位點(diǎn)的CC、CT、TT三種基因型頻率在病例組和對(duì)照組中分別是77.8％、19.7％、2.5％和72.0％、28.0％、0％。對(duì)照組中TT基因型未檢測(cè)到。兩組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。
　　 2與攜帶MMP-2-735 CT/TT、MMP-9-1562CC基因型者相比，攜帶MMP-

6、2-735 CT/TT、MMP-9-1562 CT/TT基因型者，MMP-2-735CC、MMP-9-1562CC基因型者，MMP-2-735CC、MMP9-1562 CT/TT基因型者的宮頸癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)分別是0.629倍（95％CI=0.095-4.177）、1.446倍（95％CI=0.479-4.360）和1.397倍（95％CI=0.346-5.353）。
　　 3本研究發(fā)現(xiàn)MMP-2-735C/T、MMP-9-1562C

7、/T多態(tài)性與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)明顯相關(guān)性（P>0.05）。
　　 4攜帶MMP-2-735CT基因型比攜帶CC基因型者M(jìn)MP-2 mRNA表達(dá)量有所下降。與MMP-9-1562 CC基因型相比，MMP-9-1562 CT和TT基因型的個(gè)體MMP-2 mRNA表達(dá)量升高。但均未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1在病例組和對(duì)照組人群中MMP-2-735 C/T多態(tài)性位點(diǎn)CC、CT基因型頻率及C、T等位

8、基因頻率分布無(wú)差異；MMP-9-1562 C/T多態(tài)性位點(diǎn)CC、CT、TT基因型頻率及C、T等位基因頻率分布無(wú)差異。MMP-2-735C/T、MMP-9-1562C/T多態(tài)性與天津地區(qū)婦女人群宮頸癌易感性無(wú)明顯相關(guān)性。
　　 2 MMP-2-735C/T和MMP-9-1562C/T兩個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)在宮頸癌發(fā)病過(guò)程中存在交互作用。攜帶MMP-2-735CC、MMP-9-1562TT/CT基因型以及攜帶MMP-2-735CC、MMP9