基因輸送中聚陽離子非病毒載體的表征和優(yōu)化.pdf

1、本論文包括以下幾個方面:一:我們首先對聚陽離子載體系統(tǒng)的骨架進(jìn)行表征,骨架包括簡單的聚陽離子聚賴氨酸(PLL),還包括連接了親水性聚合物聚乙二醇的復(fù)雜骨架(PEG-g-PLL).二:我們考察了聚陽離子與DNA形成的DNA復(fù)合物的大小、形貌等因素,尤其是連接有保護(hù)性聚合物PEG的聚陽離子載體,對所形成的DNA復(fù)合物的表面形貌的影響.三:功能性分子的連接能使聚陽離子非病毒載體系統(tǒng)具有某些特別的功能,已經(jīng)成為載體系統(tǒng)不可或缺的一部分,對于功能

2、性分子的表征也成為聚陽離子非病毒載體系統(tǒng)表征的重要部分.功能性分子中最重要的是靶向性分子,靶分子和受體之間的相互作用能力決定了靶向型非病毒載體在體內(nèi)的靶向性能.我們對用計算機(jī)虛擬篩選和噬菌體多肽展示庫初步篩選的分子進(jìn)行靶向能力的表征,對于小分子化合物、靶向多肽與受體之間相互作用常數(shù)的表征,我們采用了BIAcore技術(shù)和親合毛細(xì)管電泳技術(shù).我們用計算機(jī)虛擬篩選的方法,挑選了表皮生長因子受體表面新的靶分子結(jié)合位點(diǎn),用分子對接技術(shù)篩選了小分子

3、化合物庫,對篩選出的小分子進(jìn)行挑選后,用BIAcore技術(shù)進(jìn)行體外的靶向性鑒定,最后得到一個具有靶向于腫瘤表面高表達(dá)的表皮生長因子受體的小分子化合物,用BIAcore技術(shù)測定了小分子化合物與表皮生長因子受體之間的相互作用常數(shù).對于噬菌體多肽展示庫技術(shù)篩選的對表皮生長因子受體具有靶向性作用的多肽,我們用BIAcore技術(shù)進(jìn)行分子間親合作用的驗證.四:我們用BIAcore技術(shù)定量分析了不同分子量PEG修飾的PEG-g-PLL-EGF對表皮生