不同原因致大鼠急性肺損傷炎性反應(yīng)及地塞米松干預(yù)效果的差異.pdf

1、目的：急性肺損傷(ALI)是臨床上危重病患者常見的嚴(yán)重并發(fā)癥，是機(jī)體遭受嚴(yán)重感染、休克、創(chuàng)傷、胃內(nèi)容物吸入等多種原因打擊時(shí)引起的以肺泡毛細(xì)血管膜通透性增加為特征的肺部炎癥綜合癥，發(fā)病急、病情重，甚至可以發(fā)展為急性呼吸窘迫綜合癥(ARDS)。常見病因可以分為兩大類：間接因素和直接因素。前者包括嚴(yán)重感染、休克等，后者包括胃內(nèi)容物吸入、重癥肺炎等。 ARDS是以肺內(nèi)皮細(xì)胞和肺上皮細(xì)胞嚴(yán)重受損為特征的肺實(shí)質(zhì)的急性炎癥反應(yīng)，伴有致炎和抗炎

2、因子的失控性釋放。雖然對(duì)ARDS的炎癥機(jī)制的認(rèn)識(shí)取得了重大突破，但是對(duì)不同病因ARDS的炎癥機(jī)制，包括蛋白滲漏、炎癥介質(zhì)水平的差異及其原因認(rèn)識(shí)較少。盡管目前對(duì)其治療措施有很大進(jìn)展，但ARDS的病死率仍居高不下，約在50％左右，治療方面亟待取得重大突破。糖皮質(zhì)激素為一種多途徑抗炎藥物，但是其在ARDS中的臨床應(yīng)用一直存在爭議，不同原因誘發(fā)的ARDS激素治療效果差異懸殊，但原因不明，幾十年來一直令臨床醫(yī)師倍感困惑。為此，本課題以動(dòng)物模型模擬

3、常見不同誘因所致ARDS，探討激素干預(yù)效果差異及其可能的機(jī)理。 假設(shè)糖皮質(zhì)激素的治療效果和其致病因素是相關(guān)的，為此同步復(fù)制了LPS靜脈注射和HCl吸入致ARDS的大鼠動(dòng)物模型，橫向比較兩種不同模型炎癥因子的釋放水平、病理學(xué)變化及對(duì)糖皮質(zhì)激素的反應(yīng)性。 方法：試驗(yàn)用SD大鼠96只，隨機(jī)分為6組：①NS組，②LPS組，③HCl組，④NS+Dex組，⑤LPS+Dex組，⑥HCl+Dex組。每個(gè)組又隨機(jī)分為兩個(gè)亞組：非灌洗組和灌

4、洗組(病理組)，每組8只動(dòng)物。④、⑤、⑥三組為激素干預(yù)組。造模前2天腹腔注射Dex(2mg/kg)，1次/天，造模前再注射一次，總共3次。①、④二組為對(duì)照組，尾靜脈注射生理鹽水；②、⑤二組為LPS組，尾靜脈同部位注射LPS(8mg/kg)；③、⑥二組為HCl組，氣管內(nèi)滴入pH值為1.8的HCl(2ml/kg)。 復(fù)制模型后4小時(shí)，非灌洗組每組8只動(dòng)物，1％戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉(5mg/100gb.w)，經(jīng)頸動(dòng)脈插管放血處死動(dòng)物

5、，收集血液，離心(3000rpm，4℃，10min)，吸取上清，-80℃保存，檢測(cè)血清中TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-10的含量。取左肺下部，Bowin液固定，常規(guī)石蠟包埋做病理切片，觀察肺組織病理形態(tài)學(xué)變化并評(píng)分。取左肺上部W/D的測(cè)定(80℃，48h)。灌洗組每組8只動(dòng)物，1％戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉(5mg/100gb.w)，經(jīng)氣管插管行全肺支氣管肺泡灌洗，取支氣管肺泡灌洗液(BALF)，離心(1200rpm，4℃，10m

6、in)，吸取上清，-80℃保存，檢測(cè)血清中TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-10的含量和蛋白水平。細(xì)胞沉淀懸浮于等量生理鹽水中，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù)。 結(jié)論： 1.靜脈注射LPS和氣管內(nèi)滴入HCl均造成大鼠的急性肺損傷，成功地復(fù)制了兩種不同病因所致ALI模型。 2.兩個(gè)模型組在蛋白滲漏、因子水平、肺病理均存在一定的差異，說明ALI的病理生理過程和致病因素是緊密相連的。 3.糖皮質(zhì)激素的干預(yù)效果和病