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1、實(shí)驗(yàn)一:不同液體復(fù)蘇對(duì)急性肺損傷大鼠肺血管內(nèi)皮屏障功能的影響。 目的:觀察不同液體復(fù)蘇對(duì)急性肺損傷(ALI)大鼠肺血管內(nèi)皮屏障功能的影響。方法:內(nèi)毒素(LPs)靜脈注射復(fù)制大鼠ALI模型。36只清潔級(jí)SD大鼠隨機(jī)分成6組:對(duì)照組(CON),LPS組,LPS+生理鹽水(NS)組,LPS+5%人血白蛋白(ALB)組,LPS+6%羥乙基淀粉130/0.4(HES)組和LPS+4%琥珀酰明膠(GEL)組。每組給予不同的液體復(fù)蘇,4
2、h后放血處死動(dòng)物。觀察肺組織病理改變,進(jìn)行肺損傷病理評(píng)分;測(cè)定肺濕/干重比(W/D);伊文思蘭法(EBD)測(cè)定肺血管通透性;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定肺組織白細(xì)胞介素-6(IL-6)水平:比色法測(cè)定肺組織髓過(guò)氧化物酶(MPO)活性;硫代巴比土酸(TBA)法測(cè)定肺組織丙二醛(MDA)含量;末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)測(cè)定肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡。結(jié)果:與對(duì)照組比較,LPS組肺組織病理?yè)p傷加重、W/D增
3、加、肺血管內(nèi)皮通透性增高、肺組織IL-6及MDA含量增加、MPO活性增強(qiáng)、肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡增加。與NS比較,ALB,HES和GEL能夠顯著減輕LPS所導(dǎo)致的肺組織病理?yè)p傷、降低肺血管內(nèi)皮通透性、減少W/D及MDA含量、減弱MPO活性、減少肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡。與GEL比較,HES和ALB能更為顯著降低肺血管內(nèi)皮通透性,HES能夠顯著減少肺組織IL-6水平。結(jié)論:HES和ALB能顯著改善ALI受損的肺血管內(nèi)皮屏障功能。 實(shí)驗(yàn)二:不
4、同液體復(fù)蘇對(duì)急性肺損傷大鼠肺血管內(nèi)皮依賴的舒張功能的影響。 目的:觀察不同液體復(fù)蘇對(duì)急性肺損傷(ALI)大鼠肺血管內(nèi)皮依賴的舒張功能的影響。 方法:內(nèi)毒素(LPS)靜脈注射復(fù)制大鼠ALI模型。36只清潔級(jí)SD大鼠隨機(jī)分成6組:對(duì)照組(CON),LPS組,LPS+生理鹽水(NS)組,LPS+5%人血白蛋白(ALB)組,LPS+6%羥乙基淀粉130/0.4(HES)組和LPS+4%琥珀酰明膠(GEL)組。每組給予不同的液體復(fù)
5、蘇,4h后放血處死動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)實(shí)施過(guò)程中監(jiān)測(cè)平均動(dòng)脈壓(MAP)。放射免疫法測(cè)定肺組織內(nèi)皮素-1(ET-1)含量;免疫組織化學(xué)法半定量分析肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表達(dá)水平;血管張力實(shí)驗(yàn)檢測(cè)離體肺動(dòng)脈環(huán)對(duì)乙酰膽堿(Ach)介導(dǎo)的內(nèi)皮依賴的舒張功能的影響。結(jié)果:與正常對(duì)照組比較,LPS組肺組織ET-1含量增加,肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞eNOS蛋白表達(dá)減少,離體肺動(dòng)脈環(huán)對(duì)Ach介導(dǎo)的內(nèi)皮依賴的舒張百分比降低。與NS比較,ALB和H
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