疊鞘石斛中聯(lián)芐類(lèi)化合物的制備工藝及其抗氧化作用研究.pdf

1、石斛為傳統(tǒng)名貴中藥，具有養(yǎng)陰清熱，益胃生津的功效，在臨床上及中藥復(fù)方被廣泛使用。其主要含有生物堿類(lèi)、聯(lián)芐類(lèi)、菲類(lèi)、氨基酸類(lèi)、倍半萜類(lèi)、多糖類(lèi)等化學(xué)成分。聯(lián)芐類(lèi)具有抗腫瘤、抗氧化、抗血管新生、抑制NO生成等多樣的生物活性，為石斛的活性成分之一。
　　查閱文獻(xiàn)尚未有關(guān)于聯(lián)芐類(lèi)化合物提取和純化工藝的研究報(bào)道，故本課題確定以疊鞘石斛中聯(lián)芐類(lèi)化合物為研究對(duì)象，對(duì)其含量測(cè)定、提取工藝、分離純化、抗氧化作用進(jìn)行系統(tǒng)研究，以期為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)抗氧化活

2、性新制劑奠定基礎(chǔ)。
　　研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下：
　　首先，建立聯(lián)芐類(lèi)化合物的含量測(cè)定方法。以石斛酚為對(duì)照品，采用紫外-可見(jiàn)分光光度法和HPLC測(cè)定聯(lián)芐類(lèi)化合物的總量和石斛酚的含量。繪制聯(lián)芐類(lèi)化合物和石斛酚的標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程分別為A=0.0153C+0.0054，r=0.9999；Y=813.17X+13.084，r=0.9998，確立定量檢測(cè)方法。
　　其次，對(duì)疊鞘石斛中聯(lián)芐類(lèi)化合物的提取工藝進(jìn)行研究。以聯(lián)芐類(lèi)化合物

3、的提取率、石斛酚的提取率為指標(biāo)，對(duì)疊鞘石斛中聯(lián)芐類(lèi)化合物的回流提取工藝進(jìn)行單因素考察。在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，進(jìn)行主要因素設(shè)計(jì)L9(34)正交試驗(yàn)，確定最佳提取條件：乙醇濃度70％，料液比1g:12ml，每次提取2h，提取3次。
　　再次，對(duì)聯(lián)芐類(lèi)化合物的提物進(jìn)行分離純化工藝研究。以靜態(tài)飽和吸附率、解吸率為指標(biāo)，通過(guò)靜態(tài)吸附-解吸試驗(yàn)，對(duì)X-5、HPD-300、D-101、AB-8、S-8型五種大孔樹(shù)脂進(jìn)行篩選。選定 HPD-300型

4、大孔樹(shù)脂用于聯(lián)芐類(lèi)化合物的分離純化。對(duì)吸附性能和解吸性能進(jìn)行考察，確定最佳純化工藝：上樣濃度0.4g（生藥材）/ml，上樣流速0.5ml/min，上樣量3BV，用水和70%乙醇各10BV以1.0ml/min的流速洗脫，收集70%乙醇洗脫部位。純化后聯(lián)芐類(lèi)化合物純度達(dá)67.07%，較純化前提高了4.25倍；純化后石斛酚純度達(dá)0.224%，較純化前提高了4.92倍。
　　最后，以Vc為對(duì)照，通過(guò)清除AAPH?、清除DPPH?、抑制?O