IFNγ基因修飾的樹突狀細胞對小鼠抗H22肝腹水瘤的免疫調節(jié)作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本實驗在已構建好的重組真核表達質粒pcDNA3.1-IFNγ的基礎上,獲得小鼠IFNγ基因修飾的小鼠骨髓來源的DCs,擬初步觀察IFNγ基因修飾對DCs的生物學功能的影響,并以此為疫苗免疫小鼠,觀察IFNγ基因修飾DCs對荷瘤小鼠的免疫功能影響,以探討IFNγ基因修飾DCs對腫瘤的免疫治療的可行性。利用脂質體Lipofectamine將重組真核表達質粒pcDNA3.1-IFNγ轉染小鼠骨髓來源的DCs,免疫印跡分別在DCs轉染24h和4

2、8h之后檢測培養(yǎng)上清中的IFNγ和IL12p40含量,Greiss法檢測培養(yǎng)上清中的NO含量,流式細胞儀(flowcytometric,F(xiàn)CM)檢測DCs對同種異體T淋巴細胞的刺激增殖作用,MTT法檢測經(jīng)腫瘤抗原脈沖后的DCs誘導的T淋巴細胞(CTL)對腫瘤細胞的殺傷效應;用IFNγ修飾DCs經(jīng)H22肝腹水瘤細胞凍融裂解抗原脈沖之后,預防免疫昆明(KM)小鼠,共兩次,每次間隔5d,然后給每只小鼠腹腔接種H22肝腹水瘤細胞,紀錄成瘤期和小

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