MAO抑制藥物篩選模型的建立及其應(yīng)用.pdf

1、單胺氧化酶(Monoamine oxidase，MAO)是結(jié)合在線粒體外膜的一種黃素蛋白酶，可分為MAO-A和MAO-B二種亞型。MAO-A主要分布在兒茶酚胺能神經(jīng)元中，可氧化5-羥色胺(5-Hydroxytryptamine，5-HT)、去甲腎上腺素(Noradrenaline，NA)和腎上腺素等單胺類物質(zhì)，MAO-B主要分布在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和組胺能神經(jīng)元中，可氧化多巴胺（Dopamine，DA）、芐胺和β-苯乙胺等單胺類物質(zhì)。MAO-

2、A抑制藥物可提高神經(jīng)內(nèi)5-HT的濃度，用于治療焦慮癥和抑郁癥(Depression，DEP)。MAO-B抑制藥物可提高底部神經(jīng)中樞中DA的濃度，用于治療帕金森氏病(Parkinson's disease，PD)和阿爾茨海默氏病(Alzheimer'sdisease，AD)。因此，研究MAO抑制藥物已成為治療與MAO有關(guān)神經(jīng)系統(tǒng)疾病的熱點(diǎn)。迄今為止，MAO抑制藥物約有140種之多，但多數(shù)有嚴(yán)重的副作用。為此，本文建立了MAO抑制藥物的篩選

3、模型，并利用此模型進(jìn)行了篩選研究，其主要工作及其結(jié)果如下:
　　1.建立了從SD雄性大鼠肝臟制備MAO的方法。
　　2.采用紫外分光光度法，建立和優(yōu)化了MAO抑制藥物的體外篩選模型。
　　3.經(jīng)實(shí)驗(yàn)確定了體外篩選模型的條件為:在溫度37℃、酶預(yù)孵育時(shí)間20 min和反應(yīng)時(shí)間60 min下，測(cè)定MAO-A活性最佳條件為100 mmol/L磷酸鉀緩沖液(pH7.4)，MAO和底物5-HT的終濃度分別為0.40 mg/mL和

4、5mmol/L;測(cè)定MAO-B活性最佳條件為100 mmol/L磷酸鉀緩沖液(pH7.6)，MAO和底物芐胺的終濃度為0.15 mg/mL和2mmol/L。
　　4.采用MAO體外篩選模型，篩選設(shè)計(jì)合成化合物12個(gè)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明多數(shù)化合物具有抑制MAO的作用，對(duì)MAO-A的作用優(yōu)于MAO-B。其中化合物10的抑制作用最明顯，即對(duì)MAO-A和MAO-B的IC50值分別為39.773μmol/L和92.399μmol/L。