以孕激素受體為靶點的藥物篩選模型的建立與應(yīng)用.pdf

1、本論文應(yīng)用分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和藥理學(xué)常規(guī)方法建立了以孕激素受體為靶點的多種藥物篩選模型，并應(yīng)用于篩選評價結(jié)構(gòu)全新的非甾體類孕激素受體拮抗劑。具體結(jié)果如下：
　　 運(yùn)用分子克隆手段，構(gòu)建了基于MMTV-LTR應(yīng)答序列的孕激素受體報告基因質(zhì)粒MMTV-pGL3。通過在CV-1細(xì)胞中共轉(zhuǎn)染孕激素受體質(zhì)粒和MMTV-pGL3，建立了檢測孕激素受體活化轉(zhuǎn)錄藥物篩選模型。對2個經(jīng)受體競爭性結(jié)合試驗發(fā)現(xiàn)的活性化合物應(yīng)用上述模型進(jìn)行了體外藥

2、理學(xué)特征考察，確定它們?yōu)樵屑に厥荏w(hPR-B)拮抗劑。選擇其中活性較好的SH00019581與化學(xué)家合作開展構(gòu)效關(guān)系研究，獲得了一系列活性明顯提高的拮抗性結(jié)構(gòu)修飾改造物。其中代表化合物DYL-(6)-14的IC50值為79.8 nM，對多個甾體激素受體進(jìn)行的交叉反應(yīng)分析發(fā)現(xiàn)除對hAR有一定的拮抗作用外沒有其他的交叉反應(yīng)活性。初步的體內(nèi)藥效學(xué)實驗結(jié)果提示此種結(jié)構(gòu)類型具有抗孕酮作用。
　　 此外，通過鈣流檢測方法引建了以α4β2-