心梗后大鼠心肌TNF-α表達與室性心律失常系關的究研.pdf

1、第一部分TNF-α在心梗后大鼠心肌細胞中的表達特點及其在心梗后室性心律失常發(fā)生中的作用
　　目的:研究TNF-α在心梗后大鼠心室肌細胞中的表達特點及其在心梗后室性心律失常發(fā)生中的作用。
　　方法:將360只雄性SD大鼠隨機分為假手術組(Sham組,n=120)、TNF-α螯合劑組(rhTNFR:Fc組,n=120)和心肌梗死組(MI組,n=120)3組,運用LAD結扎法建立大鼠心梗模型。在MI模型建立1d、3d、7d、14d

2、、1m、2m后,分別運用程序電刺激方法,觀察是否誘發(fā)室性心律失常。同時用激光共聚焦顯微鏡觀察TNF-α蛋白在心室肌的分布情況,用WesternBlot法檢測心室肌TNF-α蛋白表達。
　　結果:與假手術組相比,各時間點心梗組大鼠程序電誘發(fā)的室性心律失常發(fā)生率率明顯增高(P<0.05);WesternBlot檢測的心室肌組織TNF-α表達明顯增加(P<0.05),且隨著心梗的病理進程TNF-α的表達逐漸增加,在14d達到峰值后逐漸降

3、低;與心梗組相比,各時間點rhTNFR:Fc組大鼠程序電誘發(fā)的室性心律失常發(fā)生率率明顯降低(P<0.05),WesternBlot檢測的心肌組織TNF-α表達顯著減少(P<0.05)。
　　結論:與假手術組相比,心梗后大鼠心肌組織TNF-α表達明顯增加,且隨心梗的病理進程其表達增加,在14d達到峰值后逐漸降低;減少TNF-α的表達可以降低心梗后室性心律失常的發(fā)生率;大量TNF-α表達在心梗后室性心律失常的發(fā)生中發(fā)揮著重要作用。

4、r>　　第二部分Cx43在心梗后大鼠心肌細胞中的表達特點及其在心梗后室性心律失常發(fā)生中的作用
　　目的:研究Cx43在心梗后大鼠心室肌細胞中的表達特點及其在心梗后室性心律失常發(fā)生中的作用。
　　方法:將240只雄性SD大鼠隨機分為假手術組(Sham組,n=120)和心肌梗死組(MI組,n=120)2組,運用LAD結扎法建立大鼠心梗模型。在MI模型建立1d、3d、7d、14d、1m、2m后,分別運用程序電刺激方法,觀察是否誘發(fā)

5、室性心律失常。同時用激光共聚焦顯微鏡觀察Cx43蛋白在心室肌的分布情況,用WesternBlot法檢測心室肌非磷酸化Cx43和磷酸化Cx43蛋白表達。
　　結果:與假手術組相比,各時間點心梗組大鼠程序電誘發(fā)的室性心律失常發(fā)生率率明顯增高(P<0.05);WesternBlot檢測的心室肌組織非磷酸化Cx43表達顯著增加(P<0.05),磷酸化Cx43表達顯著降低(P<0.05),且隨著心梗的病理進程Cx43的表達逐漸變化,在14d

6、變化最顯著并在其后穩(wěn)定存在。激光共聚焦顯微鏡觀察顯示,假手術組Cx43在心室肌細胞上分布較有序,主要分布在閏盤處;心梗組Cx43在心室肌細胞上分布紊亂,主要在心室肌細胞間側對側分布;此種異常分布也在心梗后14d最為顯著。
　　結論:心梗后大鼠心室肌組織Cx43出現非磷酸化重構,在心室肌細胞上的分布出現異常,且隨心梗的病理進程其表達增加,在14d達到峰值,并在其后穩(wěn)定存在;Cx43的表達和分布異常與心梗后室性心律失常的發(fā)生密切相關。

7、
　　第三部分大鼠心肌梗死后TNF-α對Cx43的調節(jié)作用及其對室性心律失常發(fā)生的影響
　　目的:研究TNF-α對大鼠心肌梗死后Cx43的調節(jié)作用及其對心肌梗死后室性心律失常發(fā)生的影響。
　　方法:將360只雄性SD大鼠隨機分為假手術組(Sham組,n=120)、TNF-α螯合劑組(rhTNFR:Fc組,n=120)和心肌梗死組(MI組,n=120)3組,運用LAD結扎法建立大鼠心梗模型。在MI模型建立1d、3d、7d

8、、14d、1m、2m后,分別運用程序電刺激方法,觀察是否誘發(fā)室性心律失常。同時用激光共聚焦顯微鏡觀察TNF-α和Cx43蛋白在心室肌的分布情況,用WesternBlot法檢測心室肌TNF-α、非磷酸化Cx43以及磷酸化Cx43蛋白表達。
　　結果:與假手術組相比,各時間點心梗組大鼠程序電誘發(fā)的室性心律失常發(fā)生率率明顯增高(P<0.05);WesternBlot檢測的心室肌組織TNF-α表達明顯增加(P<0.05),非磷酸化Cx43

9、表達顯著增加(P<0.05),磷酸化Cx43表達顯著降低(P<0.05)且隨著心梗的病理進程TNF-α、非磷酸化Cx43、磷酸化Cx43的表達逐漸變化,在14d達到峰值后TNF-α的表達逐漸降低,而非磷酸化Cx43、磷酸化Cx43的表達在其后穩(wěn)定存在;激光共聚焦顯微鏡觀察顯示,假手術組Cx43在心室肌細胞上分布較有序,主要分布在閏盤處;心梗組Cx43在心室肌細胞上分布紊亂,主要在心室肌細胞間側對側分布;此種異常分布也在心梗后14d最為顯

10、著。與心梗組相比,各時間點rhTNFR:Fc組大鼠程序電誘發(fā)的室性心律失常發(fā)生率率明顯降低(P<0.05),WesternBlot檢測的心室肌組織TNF-α表達顯著減少(P<0.05),非磷酸化Cx43表達顯著增加(P<0.05),磷酸化Cx43表達顯著降低(P<0.05);激光共聚焦顯微鏡觀察顯示Cx43的分布紊亂有改善,在心室肌細胞間主要呈端對端分布。
　　結論:心梗后,心室肌細胞中高表達的TNF-α可以誘導Cx43非磷酸化重